本发明公开一种含油茶皂素的抑制剂的制备方法及其在抑制蜡样芽孢杆菌催吐毒素表达中的应用，涉及抑制剂技术领域，该种含油茶皂素的抑制剂的制备方法包括S1、提取油茶皂素：S2、提取柠檬提取物、柚子皮提取物和蒲公英提取物；S3、复配：将S1中的油茶皂素、柠檬提取物、柚子皮提取物、蒲公英提取物和苯甲酸钠进行混合制备抑制剂，其中油茶皂素的质量浓度为85％‑95％，柠檬提取物、柚子皮提取物和蒲公英提取物的质量浓度为2％‑10％，苯甲酸钠的质量浓度为0.1％‑0.2％；采用本申请提供的制备方法获得的抑制剂对蜡样芽孢杆菌具有明显的生长抑制作用；采用本申请提供的制备方法获得的抑制剂能够抑制蜡样芽孢杆菌催吐毒素的表达。