本发明公开了可自失活噬菌体及其制备方法和应用。Bacillus cereus bacteriophageΔTail DK1，保藏编号为：GDMCC No：62951‑B1。其可制备适用于食品工业、养殖业防控污染菌与致病菌污染及临床上治疗病原菌感染的噬菌体制剂。所述制备方法基于噬菌体进行识别裂解宿主不依赖于基因组中尾部蛋白编码基因，敲除噬菌体基因组中的尾部蛋白编码基因，在噬菌体生产过程中使用质粒辅助尾部蛋白编码基因表达的宿主作为第一次感染子代生产者，实现该噬菌体制剂第一次感染后子代的活性保证。在实际应用中，因杀灭对象不携带尾部基因编码质粒，感染后因缺失尾部蛋白编码而无法合成活性子代，实现噬菌体自我失活。