本发明公开了一种测定杆状病毒滴度的方法，采用鼠源IgG2a类型的特异性识别包膜蛋白gp64的单克隆抗体，包括如下步骤：步骤1，细胞铺板：将细胞铺于细胞培养板中；步骤2，接种杆状病毒：将待检测的杆状病毒样品接种至步骤1的细胞培养板中；步骤3，病毒感染；步骤4，流式细胞术检测：收集被感染细胞，去除多余杆状病毒，清洗细胞，加入荧光标记抗体，上机检测；本发明的方法通过使用待测杆状病毒直接感染昆虫细胞及基于gp64抗体的流式细胞分析，在操作流程上更为简便，且不依赖实验人员对细胞病变的主观判断，使得结果更具代表性。