公开(公告)号：CN116855576A

公开(公告)日：2023-10-10

申请号：CN202310710349.3

申请日：2023-06-15

申请人： 南通药明康德医药科技有限公司

发明人： 任鋆 ,  刘嘉利 ,  丁睿清 ,  胥禄钧 ,  孙兴业

IPC分类号： C12Q1/48 ,  C12Q1/34 ,  G01N21/31

摘要： 本发明公开一种测定T7RNA聚合酶活性的方法，先将T7RNA聚合酶进行体外转录得到产物无机焦磷酸盐PPi，之后使用无机焦磷酸酶PPase水解无机焦磷酸盐PPi得到磷酸盐Pi，再加入底物7‑甲基‑6‑硫代鸟苷MESG和嘌呤核苷磷酸化酶PNPase，反应得到7‑甲基‑6‑硫代鸟嘌呤MTGua和核糖‑1‑磷酸，最后测定7‑甲基‑6‑硫代鸟嘌呤MTGua的吸光值并根据吸光值的结果建立无机焦磷酸盐PPi和T7RNA聚合酶的含量关系曲线。本发明通过计算拟合S形曲线的中值参数表征酶活，拓宽了检测信号与无机焦磷酸盐PPi生成的线性范围，使得检测的结果重复性更高，重现性更好。

公开(公告)号：CN116751838A

公开(公告)日：2023-09-15

申请号：CN202310710049.5

申请日：2023-06-15

申请人： 南通药明康德医药科技有限公司

发明人： 任鋆 ,  刘嘉利 ,  王苗 ,  闫梦茹 ,  胥禄钧 ,  孙兴业

IPC分类号： C12Q1/66 ,  C12Q1/48 ,  C12Q1/34 ,  G01N21/31

摘要： 本发明公开一种测定萤火虫荧光素酶活性的方法，通过建立化学发光反应体系和偶联酶反应体系，将萤火虫荧光素酶催化底物荧光素的反应中产生的无机焦磷酸盐(PPi)积累转化为7‑甲基‑6‑硫代鸟嘌呤(7‑methyl‑6‑thioguanosine,MTGua)，并利用该物质在360nm处产生最大光吸收的特性，提供了一种通过监测反应体系光吸收值变化来定义萤火虫荧光素酶活性的方法，对比传统的光学仪器观察法，本方法克服了传统方法时间过短、光信号强度差的缺陷，通过量化反应产物PPi，来对萤火虫荧光素酶进行活性检测，提升了检测的稳定性和灵敏性。

公开(公告)号：CN116840477A

公开(公告)日：2023-10-03

申请号：CN202310839225.5

申请日：2023-07-10

申请人： 南通药明康德医药科技有限公司

发明人： 任鋆 ,  侯胜南 ,  徐圣 ,  刘嘉利

IPC分类号： G01N33/569 ,  G01N33/577 ,  G01N33/68 ,  G01N15/14

摘要： 本发明公开了一种测定杆状病毒滴度的方法，采用鼠源IgG2a类型的特异性识别包膜蛋白gp64的单克隆抗体，包括如下步骤：步骤1，细胞铺板：将细胞铺于细胞培养板中；步骤2，接种杆状病毒：将待检测的杆状病毒样品接种至步骤1的细胞培养板中；步骤3，病毒感染；步骤4，流式细胞术检测：收集被感染细胞，去除多余杆状病毒，清洗细胞，加入荧光标记抗体，上机检测；本发明的方法通过使用待测杆状病毒直接感染昆虫细胞及基于gp64抗体的流式细胞分析，在操作流程上更为简便，且不依赖实验人员对细胞病变的主观判断，使得结果更具代表性。