本发明于生物技术领域，具体涉及一种多酶联产催化合成海藻糖的枯草芽孢杆菌及其应用。其通过在枯草芽孢杆菌中同时表达普鲁兰酶、海藻糖合酶、海藻糖水解酶的方法，实现了这三种酶在同一个菌株中不同强度的表达。具体地将普鲁兰酶基因表达元件插入至枯草芽孢杆菌基因组中表达，海藻糖合酶与海藻糖水解酶分别用不同的质粒表达的重组菌株其海藻糖转化率与基因组上未整合普鲁兰酶基因的重组菌株提高23%，为进一步实现三个酶的稳定表达，将海藻糖合酶和海藻糖水解酶表达元件插入至枯草芽孢杆菌基因组中表达。