本发明提供体外系统性评估屎肠球菌的方法，方法步骤包括：向装灭菌动物饲料的透明容器中加入模拟胃液，再加入灭菌石蜡形成厌氧培养体系，设置加有生理盐水的试验组S1、S2，再设置分别补加有屎肠球菌样品稀释液的试验组S3、S4；向S1、S2、S3、S4的胃消化液的灭菌石蜡液面以下加入模拟肠液和含牛胆碱的磷酸缓冲液，另向S2、S4补加动物粪便菌群悬液，振荡培养；对比S1，测试统计试验组S3的肠道消化液的外观变化、pH值变化、OD600nm变化以及有机酸含量变化，评估屎肠球菌的耐酸性能、耐酶性能、耐胆盐性能以及生长代谢情况；对比S2，测试统计试验组S4的肠道消化液中不同种类菌群的数量，评估屎肠球菌对其他菌群的影响，从而实现对屎肠球菌的快速系统评估。