本发明公开了一种植物生长调节剂蚯蚓多肽的制备方法，包括：步骤一、采用蒸馏水洗净蚯蚓，去除泥沙和蚯蚓粪，然后滤干，采用纯净水浸泡，滤干，得到备料；步骤二、将备料粉碎至匀浆状态，研磨成糊状，加入大豆磷脂、绿茶粉、纯净水，混合均匀呈乳化状态，于30～50℃酶解3～5h，过筛，去除大颗粒物，然后离心，收集离心上清液；步骤三、采用10000Da的透析袋透析，取滤出液，即为蚯蚓多肽自溶酶解液。具有显著提升蚯蚓多肽得率和抗寒性能的有益效果。公开了一种基于蚯蚓多肽的黄瓜幼苗抗寒方法，包括：S1、蚯蚓多肽自溶酶解液加入蒸馏水配制；S2、均匀喷施在黄瓜幼苗的叶片上。具有显著提升黄瓜幼苗抗寒能力的有益效果。