本发明属于高分子材料合成技术领域，具体涉及一种基于COF的光响应类氧化酶材料及其制备方法和应用。本发明以1,3,6,8‑四(4‑氨基苯基)芘(TPy)和含吡啶的芳香二醛(包括6‑(4‑甲酰苯基)烟醛(FPY)、[2,2’‑联吡啶]‑5,5’‑二甲醛(BPY)或2,5‑吡啶二醛(PY)等)为原料，通过希夫碱反应创建了一种基于COF的光响应类氧化酶材料(命名为TPy COF)。本发明制备的TPy COF光催化剂具有窄禁带、高载流子迁移率和小的电子转移屏障，有利于提高光捕获能力，加速电荷分离和输运，有效地提高光催化活性。本发明制备的TPy COF具有显著的光响应氧化酶样活性，可以有效地催化四甲基联苯胺(TMB)的显色底物，并实现对谷胱甘肽(GSH)、尿酸(UA)和L‑半胱氨酸(L‑Cys)的高灵敏度和高选择性检测。