本发明提供了一种用于实现新型冠状病毒异源初免‑加强免疫的试剂盒及其制备方法和应用，涉及疫苗技术领域。该试剂盒包含分别独立包装的初免试剂和加强免疫试剂，初免试剂和加强免疫试剂别独立的为新型冠状病毒DNA疫苗和新型冠状病毒重组蛋白疫苗，且为不同种类疫苗。新型冠状病毒DNA疫苗中DNA编码的抗原或抗原表位与新型冠状病毒重组蛋白疫苗中含有的抗原或抗原表位相同，或者至少具有70％的一致性。该试剂盒能够实现新型冠状病毒DNA疫苗和新型冠状病毒重组蛋白疫苗的联合免疫方案，缓解了单一种类新冠疫苗诱导的体液免疫对突变株的中和效果下降、不能同时激发强的细胞免疫及体液免疫的技术问题。