本发明公开了一种卤醇脱卤酶突变体、编码基因、质粒、基因工程菌及其应用，本发明制得的基因工程菌在催化合成(R)‑1‑氯‑3‑苯氧基‑2‑丙醇、(S)‑邻硝基苯基缩水甘油醚、(S)‑对硝基苯基缩水甘油醚、(S)‑4‑(苯氧基甲基)‑2‑恶唑烷酮，(S)‑4‑(2‑硝基苯氧基甲基)‑2‑恶唑烷酮，(S)‑4‑(4‑硝基苯氧基甲基)‑2‑恶唑烷酮时的立体选择性较高，相较卤醇脱卤原始酶的催化合成拆分的纯度和收率更高，反应时间更快，有利于工业生产。