一种加帽mRNA的制备方法
摘要:
本发明涉及一种加帽mRNA的制备方法。本发明的制备方法包括:提供反应体系;将反应体系于36~38℃孵育加帽,反应体系的组分为:1~3mg/mL体外合成的mRNA;0.5~0.9mM MgCl2;0.1~1.5U/mL RNase III;40~60mM Tris‑HCl;2~8mM KCl;0.5~2mM DTT;0.1~0.5U/μL牛痘病毒加帽酶;0.5~2U/μL Cap 2’‑O甲基转移酶;0.1~1mM GTP;0.1~0.5mM SAM;其余为无RNA酶水。本发明提高了mRNA回收率,且在保证加帽率和减少dsRNA含量的同时,提高了mRNA完整度,可为mRNA药物发展提供有力支持。
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