本申请涉及一种光激化学发光的微流控检测方法及芯片。该方法包括：将样本液从接口层的样本接口加至流道层的样本进料室；将反应所需试剂从接口层的若干试剂接口加至流道层的若干试剂进料室；定量驱使样本液和第一步反应所需试剂流入流道层的第一混合室，以在第一混合室内反应生成第一复合液；定量驱使第一复合液和第二步反应所需试剂流入流道层的第二混合室，以在第二混合室内反应生成第二复合液；定量驱使第二复合液流入流道层的发光室，检测第二复合液的化学发光信号。本申请提供的方案，能够将光激化学发光技术和微流控芯片技术相结合，较大幅度地提高了检测灵敏度和准确度。