本发明公开一种启动子突变体及其应用。本发明基于启动子PsrfA，通过对其核心区域以及两核心区域的间隔序列进行突变，获得了诱导表达活性较野生型提高的PsrfA启动子突变体，同时还提供了含所述启动子突变体的载体。利用本发明所述启动子突变体或所述载体，可提高所表达的蛋白的表达量，在蛋白表达领域具有广阔应用前景。同时，在所述启动子突变体的基础上，本发明还提供了一种NADH焦磷酸酶表达量提高的重组质粒和重组菌，可将其用于还原型烟酰胺单核苷酸的生物催化反应中，有利于还原型烟酰胺单核苷酸的大规模高效生产。