本发明公开了表达TRAIL的重组溶瘤流感病毒及应用。属于生物医药技术领域。该病毒是通过将TRAIL基因插入流感病毒HA基因片段中，然后利用流感病毒反向遗传学8质粒系统操作技术拯救得到具有复制能力和感染能力的重组流感病毒，该病毒在肿瘤细胞内能够稳定表达TRAIL蛋白，TRAIL蛋白借助HA三聚体结构形成具有生物学活性的同源三聚体形式，能够与肿瘤细胞表面受体DR4，DR5结合，从而启动死亡受体途径，特异性地诱导肿瘤细胞凋亡，达到治疗肿瘤的目的。本发明的重组溶瘤流感病毒具有杀伤肿瘤靶向性高、安全性好的优点，可用于对肿瘤的治疗。