一种C反应蛋白检测试剂盒及其使用方法和应用，属于免疫学检测技术领域。本发明为解决传统C反应蛋白检测方法存在特异性和灵敏度较低、检测过程繁琐，成本较高的技术问题，提供一种C反应蛋白检测试剂盒，所述试剂盒包括下述组分：发光试剂标记的C反应蛋白捕获抗体、催化剂标记的C反应蛋白检测抗体、发光反应辅助剂和发光反应引发剂。本发明提供的试剂盒检测浓度为3μg/L‑30mg/L，检测限为0.7μg/L；上述试剂盒的检测过程中无需洗涤，无需激发光源，简便易操作，化学发光反应快速，对于检测仪器要求和检测成本较低，特异性、灵敏度和检测结果准确性较高，可应用于检测血清中C反应蛋白的含量。