本发明属于生物分析检测技术领域，具体涉及一种具有级联反应的共价有机框架材料及其制备方法与应用。上述具有级联反应的共价有机框架材料的制备方法，包括以下步骤：将酸溶液、葡萄糖氧化酶溶液和辣根过氧化物酶溶液加至均苯三甲醛溶液中，得到混合液；再向混合液中加入对苯二胺溶液进行反应，反应结束后，反应液经处理得到上述具有级联反应的共价有机框架材料。本发明制备过程中能够实现至少两种酶的快速固定，且具有多个优点，如效率高，响应快、稳定性好、回收高效、催化活性良好，可作为葡萄糖检测的光谱纳米探针，具有广大的应用潜力。