本发明公开了一种快速鉴定5种蜡样芽孢杆菌类群菌种的分子靶标及其应用。所述分子靶标如SEQ ID NO.1‑5所示。本发明通过对已有的菌株分类信息进行真实性确证分析，对炭疽芽孢杆菌、蕈状芽孢杆菌、韦氏芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和致呕芽孢杆菌标准菌株的全基因组序列根据CRISPR/Cas12a识别需求进行切片，通过比对筛选出了高度保守且特异的靶标序列SEQ ID NO.1‑5，并利用本组实验菌株进行验证和筛选，包括引物设计和筛选，分别以炭疽芽孢杆菌、蕈状芽孢杆菌、韦氏芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和致呕芽孢杆菌为模板进行PCR‑CRISPR/Cas12a荧光法实验，实现对5种蜡样芽孢杆菌类群菌种的准确鉴别。