本申请实施例属于检测技术领域，涉及一种检测NT‑proBNP的荧光免疫层析检测卡、试剂盒和方法，所述荧光免疫层析检测卡包括卡壳和荧光免疫层析试纸条，所述荧光免疫层析试纸条设置于所述卡壳内，所述荧光免疫层析试纸条包括PVC底板以及依次搭接在所述PVC底板上的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；其中，所述结合垫包被有荧光微球标记抗体，所述荧光微球标记抗体包括荧光微球标记的NT‑proBNP抗体和荧光微球标记的羊抗鸡IgY羊源抗体；所述硝酸纤维素膜上设置有检测线和质控线，所述检测线上包被有NT‑proBNP抗体，所述质控线上包被有鸡IgY抗体。本申请检测灵敏性高。