本发明属于拉曼散射显微成像技术领域，特别涉及一种相干反斯托克斯拉曼散射光谱测量与显微成像装置及方法，包括飞秒脉冲激光器，飞秒脉冲激光器产生的激光脉冲依次经第一反射镜、第一棱镜对、刀片的边沿、第二棱镜对、第二反射镜、共振‑振镜扫描仪和物镜后照射在放置于二维精密平移台上的待测样品上，并形成散射信号；所述刀片，用于通过遮挡方式产生激光光谱陡边；散射信号经待测样品的透射部分并经聚光镜、超陡短通滤波片后，再经陷波滤波片分两路；其中一路经透镜进入第一光谱仪，用于相干反斯托克斯拉曼散射光谱测量；另一路经光电倍增管后进入到锁相放大器，用于相干反斯托克斯拉曼散射显微成像；本发明装置整体结构简单，能够快速成像。