本发明提供一种用于痛风诊断的血液代谢标志物的检测方法、试剂盒，属于诊断性生物标志物的技术领域，采集取样对象的末梢血液样本，获得干血斑样本；对干血斑样本进行前处理得到上清液；制备不同浓度的校准品，并根据配置好的液相色谱的流动相和色谱参数以及质谱的离子源参数和MRM参数对校准品进行测定获得不同血液代谢标志物的浓度标准曲线；基于同位素内标法对前处理后的血液样本上清液采用液相色谱‑质谱联用方法进行测定，根据获得的浓度标准曲线得到血液代谢标志物的含量检测结果。本发明通过采集末梢血获得干血斑样本，进而利用液相色谱‑质谱联用方法对血液代谢标志物含量进行测定，提高了痛风诊断的血液代谢标志物的检测准确度。