本发明公开了一种金龟子绿僵菌Malc2404菌株及其制备方法和应用，本发明的一种金龟子绿僵菌Malc2404菌株，金龟子绿僵菌Malc2404菌株的保藏名称为金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2024年5月30日；保藏编号：CGMCC No.41249。本发明能用于防治农业重要害虫小地老虎的生防真菌，具有对小地老虎致病性强、害虫不易产生抗药性、环保无污染的特点，可以广泛地用于小地老虎的防治。