用随机或确定的引物来重组多核苷酸序列
摘要:
公开了一种以聚合酶催化引物寡核苷酸延伸为基础的多核苷酸序列体外诱变和重组方法。该方法包括用随机序列或确定序列的引物来引导模板多核苷酸生成低水平点突变的DNA短片段。将DNA片段变性,然后进行退火用酶催化DNA聚合。重复该步骤足够次数,以生成包含原始模板多核苷酸突变体的全长基因。这些基因可用聚合酶链反应来进一步扩增并克隆入载体中以表达所编码的蛋白质。
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