本发明涉及多步骤制备DNA的方法，该方法包括将一种下列DNA克隆入细菌人工染色体(BAC)：(a)包含基因组RNA(gRNA)或RNA病毒的全长拷贝的DNA；或者(b)包含RNA病毒的一个或若干个gRNA片段的DNA，所述gRNA片段编码RNA依赖性RNA聚合酶和至少一种结构蛋白或非结构蛋白；或者(c)与(a)或(b)的序列具有至少60％同源性的DNA。此外，本发明还提供包含冠形病毒基因组RNA(gRNA)来源的序列的DNA，所述序列与冠形病毒天然序列的同源性至少为60％，而且编码RNA依赖性RNA聚合酶和至少一个结构蛋白或非结构蛋白，其中所述DNA的一个片段能够转录为可装配为病毒体的RNA。本发明进一步公开了应用所述核酸制备病毒RNA或病毒体以及包含所述DNA、病毒RNA或病毒体的药用制剂。