本实用新型公开了一种底栖动物行为观察装置，具体涉及底栖动物试验装置技术领域，包括观察箱体，观察箱体内部设置有分隔观察机构；分隔观察机构包括固定柱，固定柱设置在观察箱体内部，固定柱一侧设置有固定挡板，观察箱体顶部设置有密封盖板，观察箱体底部设置有密封底板，密封盖板和密封底板内部均安装有透光玻璃板。本实用新型通过设置分隔观察机构，实现对多种底质情况上对底栖动物的观察，在密封盖板和密封底板上均安装透光玻璃板，从顶部和底部对底栖动物行为进行观察，通过观察箱体外侧多个观察玻璃板也可侧面对不同底栖动物的行为进行观察，实现多角度和多方位全面的对底栖动物行为观察，大大提高装置适用性和使用效果。