利索-全球专利检索

  1. 登录
  2. 注册
发明专利
JPWO2017131237A1 人工単一ガイドRNA及びその用途 审中-公开

人工単一ガイドRNA及びその用途
摘要：
本発明は、天然型sgRNAと同等もしくはそれ以上の活性を有し、かつ生体内での安定性が向上した新規な人工sgRNA、並びに、該人工sgRNAとCas9とを組み合わせた効率的なCRISPR/Cas9システムを提供する。sgRNA中の、crRNAの3’末端とtracrRNAの5’末端とを繋ぐ一本鎖化のためのヌクレオチドリンカー部分を、アミノ酸誘導体リンカーに置換しても、in vitroのDNA切断アッセイで、元のsgRNAと同等以上の活性が保持される。さらに、tracrRNAのステム-ループ1とステム-ループ2との間に存在するリンカー領域及び/又はステム-ループ2のループ部分をアミノ酸誘導体リンカーに置換、あるいはsgRNAの5’末端及び/又は3’末端近傍にアミノ酸誘導体リンカーを付加/挿入しても、元のsgRNAと同等以上の活性が保持される。1以上のアミノ酸誘導体リンカーがsgRNA中に導入されることにより、生体内での安定性を向上させることができる。
摘要（英）：

The present invention has a native sgRNA equivalent to or more active, and novel artificial sgRNA with improved stability in vivo, as well as, efficient CRISPR / Cas9 that combines the artificial sgRNA and Cas9 to provide a system. In SgRNA, a nucleotide linker moieties for single stranded linking the 5 'end of the end and TracrRNA' 3 of CrRNA, be replaced with an amino acid derivative linker, a DNA cleavage assay in vitro, the original SgRNA equal or higher activity is retained with. Furthermore, stem TracrRNA - Loop 1 and stem - 5 'end and / or 3' ends of replacing the loop portion of the loop 2 in the amino acid derivative linker, or SgRNA - linker region is present and / or stem between the loop 2 be added / inserted amino acid derivative linker in the vicinity, the original sgRNA least equivalent activity is retained. By one or more amino acid derivatives linker is introduced into SgRNA, it is possible to improve the stability in vivo.

公开/授权文献
信息查询
Espacenet
0/0