人工単一ガイドRNA及びその用途
    1.
    发明专利

    公开(公告)号:JP2020198880A

    公开(公告)日:2020-12-17

    申请号:JP2020115250

    申请日:2020-07-02

    IPC分类号: C12N15/09 C12N15/113

    摘要: 【課題】天然型sgRNAと同等もしくはそれ以上の活性を有し、かつ生体内での安定性が向上した新規な人工sgRNA、並びに、該人工sgRNAとCas9とを組み合わせた効率的なCRISPR/Cas9システムの提供。 【解決手段】sgRNA中の、crRNAの3’末端とtracrRNAの5’末端とを繋ぐ一本鎖化のためのヌクレオチドリンカー部分を、アミノ酸誘導体リンカーに置換し、更に、tracrRNAのステム-ループ1とステム-ループ2との間に存在するリンカー領域及び/又はステム-ループ2のループ部分をアミノ酸誘導体リンカーに置換、あるいはsgRNAの5’末端及び/又は3’末端近傍にアミノ酸誘導体リンカーを付加/挿入した、sgRNA。 【選択図】なし

    人工単一ガイドRNA及びその用途
    2.
    发明专利

    公开(公告)号:JPWO2017131237A1

    公开(公告)日:2018-11-01

    申请号:JP2017003251

    申请日:2017-01-30

    摘要: 本発明は、天然型sgRNAと同等もしくはそれ以上の活性を有し、かつ生体内での安定性が向上した新規な人工sgRNA、並びに、該人工sgRNAとCas9とを組み合わせた効率的なCRISPR/Cas9システムを提供する。sgRNA中の、crRNAの3’末端とtracrRNAの5’末端とを繋ぐ一本鎖化のためのヌクレオチドリンカー部分を、アミノ酸誘導体リンカーに置換しても、in vitroのDNA切断アッセイで、元のsgRNAと同等以上の活性が保持される。さらに、tracrRNAのステム-ループ1とステム-ループ2との間に存在するリンカー領域及び/又はステム-ループ2のループ部分をアミノ酸誘導体リンカーに置換、あるいはsgRNAの5’末端及び/又は3’末端近傍にアミノ酸誘導体リンカーを付加/挿入しても、元のsgRNAと同等以上の活性が保持される。1以上のアミノ酸誘導体リンカーがsgRNA中に導入されることにより、生体内での安定性を向上させることができる。