公开(公告)号：CN115918544A

公开(公告)日：2023-04-07

申请号：CN202310030159.7

申请日：2023-01-10

Applicant: 中南林业科技大学

Inventor： 李宁 ,  杨国群 ,  汤阳灿 ,  黄黎君 ,  禹佩瑶 ,  陈嘉丽 ,  林增 ,  蒋东

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明涉及药用植物组织培养领域，具体公开了一种多花黄精组织培养方法，为以多花黄精未成熟种子经冷藏和机械损伤处理后得到的种子作为外植体进行组织培养。本发明的方法使用未成熟种子为材料，冷藏打破休眠，机械损伤处理促进种胚萌发得到外植体，后续针对外植体构建了一套快速、大量繁殖出多花黄精小苗的组培体系，可实现多花黄精的工厂化育苗，加快分子育种时代的推进。

公开(公告)号：CN115918544B

公开(公告)日：2023-09-15

申请号：CN202310030159.7

申请日：2023-01-10

Applicant: 中南林业科技大学

Inventor： 李宁 ,  杨国群 ,  汤阳灿 ,  黄黎君 ,  禹佩瑶 ,  陈嘉丽 ,  林增 ,  蒋东

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明涉及药用植物组织培养领域，具体公开了一种多花黄精组织培养方法，为以多花黄精未成熟种子经冷藏和机械损伤处理后得到的种子作为外植体进行组织培养。本发明的方法使用未成熟种子为材料，冷藏打破休眠，机械损伤处理促进种胚萌发得到外植体，后续针对外植体构建了一套快速、大量繁殖出多花黄精小苗的组培体系，可实现多花黄精的工厂化育苗，加快分子育种时代的推进。

公开(公告)号：CN115247145A

公开(公告)日：2022-10-28

申请号：CN202210724747.6

申请日：2022-06-24

Applicant: 中南林业科技大学

Inventor： 李宁 ,  林增 ,  黄黎君 ,  袁德义

IPC: C12N5/04 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明公开了一种油茶花瓣原生质体的分离及瞬时转化体系构建方法。具体地公开了油茶原生质体的分离方法，包括：A1)酶裂解：将油茶花瓣撕去表皮后放入酶解液中，置于28℃黑暗条件下酶解7.5～8h，得到原生质体悬浮液；所述酶解液的组成为：3％(30g/L)纤维素酶R10、1％离析酶R10(10g/L)、0.5M甘露醇、20mMMES、20mM KCl和10mM CaCl2，余量为水；A2)分离。本发明还提供了油茶原生质体的瞬时转化方法。本发明方法取材方便，无需无菌组培，省去大量前期准备工作，原生质体分离效率高且损失小，转化率可高达80％以上，为油茶基因功能的研究提供了强力支撑。

公开(公告)号：CN115247145B

公开(公告)日：2024-05-28

申请号：CN202210724747.6

申请日：2022-06-24

Applicant: 中南林业科技大学

Inventor： 李宁 ,  林增 ,  黄黎君 ,  袁德义

IPC: C12N5/04 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明公开了一种油茶花瓣原生质体的分离及瞬时转化体系构建方法。具体地公开了油茶原生质体的分离方法，包括：A1)酶裂解：将油茶花瓣撕去表皮后放入酶解液中，置于28℃黑暗条件下酶解7.5～8h，得到原生质体悬浮液；所述酶解液的组成为：3％(30g/L)纤维素酶R10、1％离析酶R10(10g/L)、0.5M甘露醇、20mMMES、20mM KCl和10mM CaCl2，余量为水；A2)分离。本发明还提供了油茶原生质体的瞬时转化方法。本发明方法取材方便，无需无菌组培，省去大量前期准备工作，原生质体分离效率高且损失小，转化率可高达80％以上，为油茶基因功能的研究提供了强力支撑。