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公开(公告)号:CN118325855B
公开(公告)日:2024-09-20
申请号:CN202410751672.X
申请日:2024-06-12
IPC分类号: C12N7/01 , C12N15/44 , C12N15/40 , C12N15/85 , A61K39/145 , A61K39/12 , A61P31/16 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要: 本发明公开了一种表达H9N2亚型AIV HA和IBDV VP2基因的重组马立克氏病病毒株及其构建方法和应用。本发明利用重组克隆技术,将包含CMV启动子序列、IBDV VP2基因及终止子序列的基因片段CMV‑VP2插入MDV基因缺失疫苗株(rMSΔMeq株)US2基因内部,同时,将包含SV40启动子序列、H9N2亚型AIV HA基因及终止子序列的基因片段SV40‑HA插入rMSΔMeq株UL41基因内部,得到表达H9N2亚型AIV HA基因和IBDV VP2基因的重组马立克氏病病毒株,命名为rMDV‑VP2‑HA。rMDV‑VP2‑HA具有与亲本病毒rMSΔMeq同等的体外复制能力以及良好的遗传稳定性,并且免疫鸡后可对IBDV超强毒株及H9N2亚型AIV均提供良好的保护效果。本发明的提出为同时预防IBDV及H9N2亚型AIV感染的重组MDV活载体疫苗的研制提供了技术手段。
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公开(公告)号:CN116478937A
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202310686418.1
申请日:2023-06-12
摘要: 本发明公开了一株基因III型禽呼肠孤病毒变异株及其在制备疫苗中的应用。本发明从送检的病鸡关节组织中成功分离到1株基因III型禽呼肠孤病毒变异株,命名为ARV‑HLJ21‑1690401,该变异株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC NO.45563。σC基因遗传进化分析结果表明,该变异株位于ARV基因III型分支。该变异株对鸡胚和SPF鸡均具有明显的致病性,可引起接种鸡胚90%死亡,接种6周龄SPF鸡100%发病。将其制备灭活疫苗,免疫SPF鸡可诱导产生较好的抗体水平,并能为同基因型毒株提供完全免疫保护。本发明的提出为预防禽呼肠孤病毒病提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN116445493A
公开(公告)日:2023-07-18
申请号:CN202211216666.1
申请日:2022-09-30
IPC分类号: C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027
摘要: 本发明公开了一种突变后的Tva基因及其在抗A亚群及K亚群禽白血病病毒感染中的应用。所述的突变后的禽白血病病毒受体基因(Tva)所编码的Tva蛋白的第58位的氨基酸G突变为N、第59位的H突变为D,第69位的W突变为L、第70位的G突变为PQR。本发明发现Tva作为A亚群及K亚群禽白血病病毒的共受体分子,将其关键功能性氨基酸位点G58、H59、W69及G70突变后,构建相应的Tva表达质粒,将其转染Tva缺失的DF‑1细胞后,其无法介导A、K亚群ALV感染宿主细胞,丧失了其作为禽白血病病毒受体的功能。本发明的提出为进一步研究Tva基因的功能及建立同时抗A、K亚群ALV感染的细胞系提供了技术手段。
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公开(公告)号:CN115287270B
公开(公告)日:2023-01-06
申请号:CN202211223789.8
申请日:2022-10-09
IPC分类号: C12N7/00 , A61K39/155 , A61P31/14 , A61P11/02 , C12R1/93
摘要: 本发明公开了一种B亚型禽偏肺病毒传代致弱株及其应用。本发明通过在Vero细胞中连续传代来致弱LN16‑V毒株,获得了致弱株LN16‑A,命名为LN16‑A株,其保藏号为:CGMCC NO.45261。将传代致弱株LN16‑A免疫3周龄SPF鸡并进行了系统的免疫保护评价,结果表明LN16‑A免疫机体后,可以诱导产生较高水平的aMPV特异性抗体和中和抗体,对强毒的攻击可提供100%的免疫保护,具有良好的免疫保护效果,可以有效预防强毒攻击造成的病理损伤。本发明为B亚型禽偏肺病毒病的防控提供了新的技术手段,对家禽业健康发展具有重要意义。
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公开(公告)号:CN110261599B
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN201910406683.3
申请日:2019-05-16
IPC分类号: G01N33/535 , G01N33/569 , G01N33/537
摘要: 本发明公开了一种检测A、B亚群禽白血病病毒抗体的ELISA试剂盒及其应用。包括包被截短表达的ALV‑A gp85蛋白以及截短表达的ALV‑B gp85蛋白的酶标板,其中,所述的截短表达的ALV‑A gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述的截短表达的ALV‑B gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明利用截短表达的A、B亚群禽白血病病毒的gp85蛋白建立了A、B亚群禽白血病病毒的抗体间接ELISA检测方法,试验表明,该试剂盒用于检测A、B亚群禽白血病病毒抗体时,其敏感性与同类进口试剂盒相当,但特异性优于同类进口试剂盒,与J亚群禽白血病病毒抗体无交叉反应。本发明的提出为A、B亚群禽白血病病毒的检测和流行病学调查以及早期诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN111647568A
公开(公告)日:2020-09-11
申请号:CN202010312138.0
申请日:2020-04-20
摘要: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒新型变异株反向遗传疫苗株及其应用。所述的鸡传染性法氏囊病病毒新型变异株反向遗传疫苗株,命名为rGtVarVP2,该疫苗株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.19383,保藏时间为2020年3月12日。rGtVarVP2是一株以弱毒株Gt为骨架,其主要保护性抗原基因VP2被新型变异株SHG19相应区段替换的重组IBDV,且SHG19的VP2被引入了双点突变Q253H/A284T。双点突变Q253H/A284T的引入使原本不能够适应体外细胞系的重组毒株能够在DF1细胞上增殖。将重组病毒rGtVarVP2在DF1细胞上扩繁,然后制备成IBDV新型变异株反向遗传疫苗(rGtVarVP2株),动物试验表明,IBDV新型变异株反向遗传疫苗(rGtVarVP2株)安全、有效。
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公开(公告)号:CN110358733A
公开(公告)日:2019-10-22
申请号:CN201910439753.5
申请日:2019-05-24
摘要: 本发明公开了一株稳定表达A亚群禽白血病病毒(ALV-A)gp85蛋白的细胞系及应用。所述的稳定表达A亚群禽白血病病毒gp85蛋白的细胞系,命名为293F-Agp85,该细胞系保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其菌种保藏编号为CGMCC NO.17420。实验证明,该细胞系可以高效稳定表达A亚群禽白血病病毒gp85蛋白,其表达量高达25mg/L。此外,通过与细胞受体Tva互作和结合试验结果表明,由本发明细胞系表达获得的ALV-A gp85蛋白具有正常的生物学活性,能够与细胞受体正常结合,并没有影响其生物学活性,且由于其表达量高,不需要转染,成本低,在体外研究ALV-A感染细胞的机制和建立抗体检测方法等防控技术领域将具有良好的应用前景和意义。
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公开(公告)号:CN118325854A
公开(公告)日:2024-07-12
申请号:CN202410750444.0
申请日:2024-06-12
摘要: 本发明公开了一种表达varIBDV VP2基因的重组Meq基因缺失马立克氏病病毒株及其构建方法与应用。所述的重组Meq基因缺失马立克氏病病毒株是利用重组克隆技术,将包含CMV启动子序列、varIBDV VP2基因及终止子序列的基因片段CMV‑VP2插入Meq基因缺失的马立克氏病病毒株rMSΔMeq US2基因内部,并替换rMSΔMeq基因组第156501‑157116位之间的核苷酸序列获得的,命名为rMDV‑varVP2。研究表明,本发明获得的重组Meq基因缺失马立克氏病病毒rMDV‑varVP2具有与亲本病毒rMSΔMeq株同等的体外复制能力以及良好的遗传稳定性,并且,rMDV‑varVP2免疫鸡后可对IBDV变异株提供良好的保护效果。本发明为重组MDV活载体疫苗的研制提供了技术手段。
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公开(公告)号:CN117625688B
公开(公告)日:2024-04-30
申请号:CN202410109544.5
申请日:2024-01-26
IPC分类号: C12N15/85 , C12N15/45 , C12N15/40 , C12N7/01 , C12N7/04 , A61K39/295 , A61K39/155 , A61K39/15 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要: 本发明公开了B亚型禽偏肺病毒(Avian metapneumovirus,aMPV)反向遗传操作系统及其应用。所述的反向遗传操作系统包括B亚型禽偏肺病毒全长cDNA感染性克隆质粒以及辅助质粒,所述的B亚型禽偏肺病毒全长cDNA感染性克隆质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了该系统在研究B亚型禽偏肺病毒致病机制以及制备以B亚型禽偏肺病毒为载体的疫苗中的应用。通过该反向遗传操作系统本发明制备得到了一种表达vvIBDV VP2蛋白的重组B亚型aMPV弱毒疫苗株,并对该疫苗株的免疫保护效果进行评价,结果发现该疫苗株可对vvIBDV和aMPV两种病毒提供100%的免疫保护。本发明为B亚型禽偏肺病毒致病机制的研究以及作为疫苗载体提供了技术手段,对家禽业健康发展具有重要意义。
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公开(公告)号:CN117625688A
公开(公告)日:2024-03-01
申请号:CN202410109544.5
申请日:2024-01-26
IPC分类号: C12N15/85 , C12N15/45 , C12N15/40 , C12N7/01 , C12N7/04 , A61K39/295 , A61K39/155 , A61K39/15 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要: 本发明公开了B亚型禽偏肺病毒(Avian metapneumovirus,aMPV)反向遗传操作系统及其应用。所述的反向遗传操作系统包括B亚型禽偏肺病毒全长cDNA感染性克隆质粒以及辅助质粒,所述的B亚型禽偏肺病毒全长cDNA感染性克隆质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了该系统在研究B亚型禽偏肺病毒致病机制以及制备以B亚型禽偏肺病毒为载体的疫苗中的应用。通过该反向遗传操作系统本发明制备得到了一种表达vvIBDV VP2蛋白的重组B亚型aMPV弱毒疫苗株,并对该疫苗株的免疫保护效果进行评价,结果发现该疫苗株可对vvIBDV和aMPV两种病毒提供100%的免疫保护。本发明为B亚型禽偏肺病毒致病机制的研究以及作为疫苗载体提供了技术手段,对家禽业健康发展具有重要意义。
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