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公开(公告)号：CN118325855B
公开(公告)日：2024-09-20
申请号：CN202410751672.X
申请日：2024-06-12
IPC分类号： C12N7/01 , C12N15/44 , C12N15/40 , C12N15/85 , A61K39/145 , A61K39/12 , A61P31/16 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种表达H9N2亚型AIV HA和IBDV VP2基因的重组马立克氏病病毒株及其构建方法和应用。本发明利用重组克隆技术，将包含CMV启动子序列、IBDV VP2基因及终止子序列的基因片段CMV‑VP2插入MDV基因缺失疫苗株（rMSΔMeq株）US2基因内部，同时，将包含SV40启动子序列、H9N2亚型AIV HA基因及终止子序列的基因片段SV40‑HA插入rMSΔMeq株UL41基因内部，得到表达H9N2亚型AIV HA基因和IBDV VP2基因的重组马立克氏病病毒株，命名为rMDV‑VP2‑HA。rMDV‑VP2‑HA具有与亲本病毒rMSΔMeq同等的体外复制能力以及良好的遗传稳定性，并且免疫鸡后可对IBDV超强毒株及H9N2亚型AIV均提供良好的保护效果。本发明的提出为同时预防IBDV及H9N2亚型AIV感染的重组MDV活载体疫苗的研制提供了技术手段。
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公开(公告)号：CN116478937A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310686418.1
申请日：2023-06-12
摘要： 本发明公开了一株基因III型禽呼肠孤病毒变异株及其在制备疫苗中的应用。本发明从送检的病鸡关节组织中成功分离到1株基因III型禽呼肠孤病毒变异株，命名为ARV‑HLJ21‑1690401，该变异株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.45563。σC基因遗传进化分析结果表明，该变异株位于ARV基因III型分支。该变异株对鸡胚和SPF鸡均具有明显的致病性，可引起接种鸡胚90%死亡，接种6周龄SPF鸡100%发病。将其制备灭活疫苗，免疫SPF鸡可诱导产生较好的抗体水平，并能为同基因型毒株提供完全免疫保护。本发明的提出为预防禽呼肠孤病毒病提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN116445493A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202211216666.1
申请日：2022-09-30
IPC分类号： C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027
摘要： 本发明公开了一种突变后的Tva基因及其在抗A亚群及K亚群禽白血病病毒感染中的应用。所述的突变后的禽白血病病毒受体基因(Tva)所编码的Tva蛋白的第58位的氨基酸G突变为N、第59位的H突变为D，第69位的W突变为L、第70位的G突变为PQR。本发明发现Tva作为A亚群及K亚群禽白血病病毒的共受体分子，将其关键功能性氨基酸位点G58、H59、W69及G70突变后，构建相应的Tva表达质粒，将其转染Tva缺失的DF‑1细胞后，其无法介导A、K亚群ALV感染宿主细胞，丧失了其作为禽白血病病毒受体的功能。本发明的提出为进一步研究Tva基因的功能及建立同时抗A、K亚群ALV感染的细胞系提供了技术手段。
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公开(公告)号：CN115287270B
公开(公告)日：2023-01-06
申请号：CN202211223789.8
申请日：2022-10-09
IPC分类号： C12N7/00 , A61K39/155 , A61P31/14 , A61P11/02 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种B亚型禽偏肺病毒传代致弱株及其应用。本发明通过在Vero细胞中连续传代来致弱LN16‑V毒株，获得了致弱株LN16‑A，命名为LN16‑A株，其保藏号为：CGMCC NO.45261。将传代致弱株LN16‑A免疫3周龄SPF鸡并进行了系统的免疫保护评价，结果表明LN16‑A免疫机体后，可以诱导产生较高水平的aMPV特异性抗体和中和抗体，对强毒的攻击可提供100%的免疫保护，具有良好的免疫保护效果，可以有效预防强毒攻击造成的病理损伤。本发明为B亚型禽偏肺病毒病的防控提供了新的技术手段，对家禽业健康发展具有重要意义。
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公开(公告)号：CN118325855A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410751672.X
申请日：2024-06-12
IPC分类号： C12N7/01 , C12N15/44 , C12N15/40 , C12N15/85 , A61K39/145 , A61K39/12 , A61P31/16 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种表达H9N2亚型AIV HA和IBDV VP2基因的重组马立克氏病病毒株及其构建方法和应用。本发明利用重组克隆技术，将包含CMV启动子序列、IBDV VP2基因及终止子序列的基因片段CMV‑VP2插入MDV基因缺失疫苗株（rMSΔMeq株）US2基因内部，同时，将包含SV40启动子序列、H9N2亚型AIV HA基因及终止子序列的基因片段SV40‑HA插入rMSΔMeq株UL41基因内部，得到表达H9N2亚型AIV HA基因和IBDV VP2基因的重组马立克氏病病毒株，命名为rMDV‑VP2‑HA。rMDV‑VP2‑HA具有与亲本病毒rMSΔMeq同等的体外复制能力以及良好的遗传稳定性，并且免疫鸡后可对IBDV超强毒株及H9N2亚型AIV均提供良好的保护效果。本发明的提出为同时预防IBDV及H9N2亚型AIV感染的重组MDV活载体疫苗的研制提供了技术手段。
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公开(公告)号：CN117625689A
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202410109575.0
申请日：2024-01-26
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/45 , C12N15/40 , C12N7/01 , C12N7/04 , A61K39/295 , A61K39/155 , A61K39/15 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种表达IBDV VP2蛋白的B亚型禽偏肺病毒疫苗株。所述的疫苗株是由表达传染性法氏囊病病毒新型变异株VP2蛋白的重组B亚型禽偏肺病毒株全长cDNA感染性克隆质粒通过病毒拯救后获得的，所述的质粒命名为pOK‑LN16A‑nVarVP2，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。将拯救后获得的rLN16A‑nVarVP2株免疫2周龄SPF鸡并进行了免疫保护评价，发现rLN16A‑nVarVP2株可同时诱导免疫鸡只产生针对nVarIBDV和aMPV的中和抗体，可对nVarIBDV和aMPV两种病毒提供100%免疫保护，并且有效的预防aMPV和nVarIBDV对靶器官鼻甲骨和法氏囊的病理损伤。因此，本发明的提出为B亚型aMPV和nVarIBDV两种病毒病的防控提供了新的技术手段，对家禽业健康发展具有重要意义。
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公开(公告)号：CN115287270A
公开(公告)日：2022-11-04
申请号：CN202211223789.8
申请日：2022-10-09
IPC分类号： C12N7/00 , A61K39/155 , A61P31/14 , A61P11/02 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种B亚型禽偏肺病毒传代致弱株及其应用。本发明通过在Vero细胞中连续传代来致弱LN16‑V毒株，获得了致弱株LN16‑A，命名为LN16‑A株，其保藏号为：CGMCC NO.45261。将传代致弱株LN16‑A免疫3周龄SPF鸡并进行了系统的免疫保护评价，结果表明LN16‑A免疫机体后，可以诱导产生较高水平的aMPV特异性抗体和中和抗体，对强毒的攻击可提供100%的免疫保护，具有良好的免疫保护效果，可以有效预防强毒攻击造成的病理损伤。本发明为B亚型禽偏肺病毒病的防控提供了新的技术手段，对家禽业健康发展具有重要意义。
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公开(公告)号：CN117625689B
公开(公告)日：2024-04-30
申请号：CN202410109575.0
申请日：2024-01-26
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/45 , C12N15/40 , C12N7/01 , C12N7/04 , A61K39/295 , A61K39/155 , A61K39/15 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种表达IBDV VP2蛋白的B亚型禽偏肺病毒疫苗株。所述的疫苗株是由表达传染性法氏囊病病毒新型变异株VP2蛋白的重组B亚型禽偏肺病毒株全长cDNA感染性克隆质粒通过病毒拯救后获得的，所述的质粒命名为pOK‑LN16A‑nVarVP2，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。将拯救后获得的rLN16A‑nVarVP2株免疫2周龄SPF鸡并进行了免疫保护评价，发现rLN16A‑nVarVP2株可同时诱导免疫鸡只产生针对nVarIBDV和aMPV的中和抗体，可对nVarIBDV和aMPV两种病毒提供100%免疫保护，并且有效的预防aMPV和nVarIBDV对靶器官鼻甲骨和法氏囊的病理损伤。因此，本发明的提出为B亚型aMPV和nVarIBDV两种病毒病的防控提供了新的技术手段，对家禽业健康发展具有重要意义。
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公开(公告)号：CN116478937B
公开(公告)日：2023-08-18
申请号：CN202310686418.1
申请日：2023-06-12
摘要： 本发明公开了一株基因III型禽呼肠孤病毒变异株及其在制备疫苗中的应用。本发明从送检的病鸡关节组织中成功分离到1株基因III型禽呼肠孤病毒变异株，命名为ARV‑HLJ21‑1690401，该变异株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.45563。σC基因遗传进化分析结果表明，该变异株位于ARV基因III型分支。该变异株对鸡胚和SPF鸡均具有明显的致病性，可引起接种鸡胚90%死亡，接种6周龄SPF鸡100%发病。将其制备灭活疫苗，免疫SPF鸡可诱导产生较好的抗体水平，并能为同基因型毒株提供完全免疫保护。本发明的提出为预防禽呼肠孤病毒病提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN115704033A
公开(公告)日：2023-02-17
申请号：CN202210114185.3
申请日：2022-01-30
IPC分类号： C12N15/12 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/55 , C12N15/85 , C07K14/705
摘要： 本发明公开了一种突变后的K亚群禽白血病病毒(ALV‑K)受体基因(Tva)及其在抗K亚群禽白血病病毒感染中的应用。本发明鉴定了介导ALV‑K感染鸡细胞的受体蛋白Tva的关键功能性氨基酸位点E53、L55、H59及G70，发现将这四个位点突变后，将导致ALV‑K无法感染宿主细胞。进一步的，本发明还公开了一种构建抗ALV‑K感染的DF‑1细胞系的方法，该方法利用CRISPR/Cas9方法和流式细胞术筛选，将Tva基因作为ALV‑K受体的关键氨基酸位点E53、L55、H59及G70进行突变。结果表明，含有上述位点突变的替换序列可高效定点替换Tva基因的相应序列；Tva基因编辑细胞系可在不影响细胞增殖水平的条件下抵抗ALV‑K的感染。本发明的提出为进一步研究Tva基因的功能及建立抗ALV‑K感染新技术奠定了基础。
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