公开(公告)号：CN111471634A

公开(公告)日：2020-07-31

申请号：CN202010178390.7

申请日：2020-03-14

申请人： 天津大学青岛海洋技术研究院

发明人： 宋浩 ,  杨绍梅 ,  张国银 ,  蔡志刚

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/54 ,  C12N15/53 ,  C12N15/60 ,  C12P7/66 ,  C12R1/125

摘要： 本发明公开了一种遗传改造枯草芽孢杆菌的方法，包括下列步骤：（一）出发菌株MK3-MEP123-ΔdhbB的构建；（二）过表达甘油激酶基因glpK和甘油-3-磷酸脱氢酶基因glpD；（三）敲除丙酮醛合成酶编码基因mgsA和甘油-1-磷酸脱氢酶编码基因araM。本发明依次过表达glpK、glpD，增加甘油利用率，促进二羟丙酮磷酸的合成，进而增加MK-7的合成；依次敲除mgsA、araM，分别阻断丙酮醛及甘油1-磷酸的合成，减少二羟丙酮磷酸的消耗，促进MK-7的合成，得到的重组菌株BSMK_4，在500 mL摇瓶中发酵96 h，MK-7产量为70.3 mg/L，较出发菌MK3-MEP123-ΔdhbB（55.6 mg/L）提高26.4%。

公开(公告)号：CN111560383A

公开(公告)日：2020-08-21

申请号：CN202010178402.6

申请日：2020-03-14

申请人： 天津大学青岛海洋技术研究院

发明人： 宋浩 ,  杨绍梅 ,  张国银 ,  蔡志刚

IPC分类号： C12N15/31 ,  C12N1/21 ,  C12P7/66 ,  C12R1/125

摘要： 本发明公开了一种促进枯草芽孢杆菌合成甲萘醌-7的基因修饰方法，包括下列步骤：（一）出发菌株BSMK_9的构建；（二）过表达透明颤菌血红蛋白基因vgb。本发明以来源于枯草芽孢杆菌168的BSMK_9为出发菌株，通过过表达透明颤菌血红蛋白，促进细胞胞内氧的传输和提高氧的利用效率，考察其对MK-7合成的影响；并通过优化碳源组合及上罐发酵，促进MK-7的最大合成量，为将来遗传改造及发酵优化纳豆芽孢杆菌构建MK-7高产菌株提供理论依据。