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公开(公告)号：CN110894487A
公开(公告)日：2020-03-20
申请号：CN201911338744.3
申请日：2019-12-23
申请人： 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司
IPC分类号： C12N5/071
摘要： 本发明涉及一种无血清无蛋白CHO细胞培养基及其制备方法、应用，属于CHO细胞培养技术领域。本发明的CHO细胞培养基包含氨基酸、维生素、微量元素、无机盐、脂类、碳水化合物和添加剂，所述脂类包括：亚麻酸0.02-0.15mg/L、孕酮0.02-0.15mg/L、亚油酸0.04-0.24mg/L、胆固醇1-7.5mg/L和花生四烯酸0.001-0.008mg/L。培养基中营养成分均衡，尤其是脂类、碳水化合物和添加剂物质充分，在该培养基中CHO细胞生长倍数可高达20.88。在利用CHO细胞表达目的蛋白时，使用前述培养基不仅CHO细胞的生长倍数高，并且CHO细胞中目的蛋白的含量仍然能够达到较高的水平。
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公开(公告)号：CN117586351A
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202311625165.3
申请日：2023-11-30
申请人： 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司 , 新乡学院
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及稳定子、融合蛋白、表达载体、表达系统、及其应用。本发明提供的稳定子，具有特定的氨基酸序列结构，通过融合在目的蛋白C末端的方式与目的蛋白融合表达，一方面能够实现目的蛋白稳定表达水平，另一方面能够提高目的蛋白稳定性，使得目的蛋白能够抵抗蛋白酶水解。
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公开(公告)号：CN111304144B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN201911207739.9
申请日：2019-11-30
申请人： 河南普诺易生物制品研究院有限公司 , 新乡医学院
摘要： 本发明涉及生物制药技术领域，具体涉及一种昆虫细胞培养基及其制备方法。该培养基有效成分包括氨基酸、维生素、无机盐、碳源、脂类物质和功能添加剂；其中功能添加剂包括腐胺、抗坏血酸磷酸酯镁、乙醇胺、次黄嘌呤、酵母提取物、棉籽水解物、丙酸钠、泊洛沙姆188、柠檬酸铁、柠檬酸钠、丙酮酸钠。本发明公开的培养基无血清、无蛋白，能避免添加血清带来的潜在风险及利于下游重组蛋白的纯化；同时培养基不含动物源添加物，适合生物药物的生产；本发明公开的培养基活细胞密度与细胞存活率高，蛋白表达量高，适合重组蛋白和疫苗的生产。
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公开(公告)号：CN114807145B
公开(公告)日：2024-02-20
申请号：CN202210619725.3
申请日：2022-06-02
申请人： 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/12 , C12N15/53 , C12N15/13
摘要： 本发明提供了一种提高非帽子依赖翻译效率的前导序列及其应用，属于基因工程技术领域。所述前导序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的前导序列能有效提高瞬时哺乳细胞表达系统中非帽子依赖内部核糖体进入位点(internalribozymeentrysite，IRES)元件介导的目的基因的表达量。
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公开(公告)号：CN114807145A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210619725.3
申请日：2022-06-02
申请人： 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/12 , C12N15/53 , C12N15/13
摘要： 本发明提供了一种提高非帽子依赖翻译效率的前导序列及其应用，属于基因工程技术领域。所述前导序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的前导序列能有效提高瞬时哺乳细胞表达系统中非帽子依赖内部核糖体进入位点(internalribozymeentrysite，IRES)元件介导的目的基因的表达量。
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公开(公告)号：CN112592388A
公开(公告)日：2021-04-02
申请号：CN202011476275.4
申请日：2020-12-14
申请人： 河南普诺易生物制品研究院有限公司 , 新乡医学院
IPC分类号： C07K14/09 , C07K14/095 , C12N15/85 , C07K16/24
摘要： 本发明涉及一种2A肽、双顺反子表达载体、重组蛋白表达系统及应用。本发明提供了一种2A肽(SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：3)，提供了含有所述2A肽编码基因的双顺反子表达载体及其构建方法，并通过构建含有所述2A肽的重组蛋白表达系统，将其应用于重组蛋白的表达，可以实现2个目的基因在哺乳动物细胞的高效表达。试验证明，在同等条件下，与其他2A肽比较，本发明提供的基于E2A和F2A的重组蛋白表达系统能够显著提高哺乳动物细胞重组蛋白的稳定表达水平，可广泛应用于制备各种目的蛋白，特别是抗体的制备。为改善哺乳动物细胞表达系统，进一步提高重组蛋白的表达量、增强细胞株的稳定性、降低生产成本奠定了基础。
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公开(公告)号：CN112321683A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN202011060210.1
申请日：2020-09-30
申请人： 河南普诺易生物制品研究院有限公司 , 新乡医学院
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种外显子连接蛋白、核酸分子、表达载体、重组蛋白表达系统、应用。本发明公开了一种具有如SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的外显子连接蛋白，通过构建含有外显子连接蛋白基因序列的重组蛋白表达系统，将外显子连接蛋白应用于重组蛋白的表达，同等条件下，与不含外显子连接蛋白的细胞系进行比较，能够显著提高重组蛋白的表达量，表达水平提高6～11倍多，降低生产成本。
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公开(公告)号：CN111304144A
公开(公告)日：2020-06-19
申请号：CN201911207739.9
申请日：2019-11-30
申请人： 河南普诺易生物制品研究院有限公司 , 新乡医学院
摘要： 本发明涉及生物制药技术领域，具体涉及一种昆虫细胞培养基及其制备方法。该培养基有效成分包括氨基酸、维生素、无机盐、碳源、脂类物质和功能添加剂；其中功能添加剂包括腐胺、抗坏血酸磷酸酯镁、乙醇胺、次黄嘌呤、酵母提取物、棉籽水解物、丙酸钠、泊洛沙姆188、柠檬酸铁、柠檬酸钠、丙酮酸钠。本发明公开的培养基无血清、无蛋白，能避免添加血清带来的潜在风险及利于下游重组蛋白的纯化；同时培养基不含动物源添加物，适合生物药物的生产；本发明公开的培养基活细胞密度与细胞存活率高，蛋白表达量高，适合重组蛋白和疫苗的生产。
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公开(公告)号：CN114891829B
公开(公告)日：2023-09-26
申请号：CN202210573172.2
申请日：2022-05-24
申请人： 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司
摘要： 本发明属于表达载体领域，具体涉及一种肝特异性游离型表达载体和基因治疗载体及其应用。该肝特异性游离型表达载体使用肝特异性启动子替换骨架游离表达载体pEMM中的EF‑1α启动子，将增强子序列无缝克隆至所述肝特异性启动子序列的上游。本发明提供的肝特异性游离型表达载体，是以pEMM作为基础载体构建，能够显著提高所携带目的基因的表达水平，同等条件下，用增强子修饰的肝特异性启动子的游离表达载体比不含增强子的载体可显著提高目的基因的表达。
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公开(公告)号：CN116121301A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202211584487.3
申请日：2022-12-09
申请人： 新乡医学院 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司
摘要： 本发明涉及miRNA在CHO细胞重组蛋白表达中的应用。本发明通过在用于表达重组蛋白的CHO细胞中转染miR‑885‑3p或miR‑185‑5p的模拟物或包含有其前体序列的重组表达载体，能明显提高重组蛋白的表达量。本发明的方法可以提高CHO细胞重组蛋白的产量，可以应用于CHO重组蛋白生产方面，为CHO细胞中重组蛋白表达量的提高提供一种新的思路。
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