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公开(公告)号：CN114903986A
公开(公告)日：2022-08-16
申请号：CN202210656141.3
申请日：2022-06-11
申请人： 武汉科前生物股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种猪链球菌三组分亚单位疫苗其制备方法，该疫苗含抗原HP0526、抗原HP1130、抗原HP0918和佐剂，抗原HP0526的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，抗原HP1130的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示，抗原HP0918的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示。该疫苗的制备方法为：利用基因克隆、蛋白表达和纯化技术获得抗原HP0526、抗原HP1130、抗原HP0918，将抗原HP0526、抗原HP1130、抗原HP0918与佐剂混合，制备猪链球菌三组分亚单位疫苗。该三组分亚单位疫苗可用于保护猪对抗猪链球菌血清2、3、7和9型的感染，且比市售猪链球菌亚单位疫苗和灭活疫苗的效果更佳。
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公开(公告)号：CN117384863A
公开(公告)日：2024-01-12
申请号：CN202311350237.8
申请日：2023-10-18
申请人： 武汉科前生物股份有限公司
IPC分类号： C12N7/00 , C12N7/08 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及猪伪狂犬病病毒自然传代弱毒变异株JS18‑150及其应用。申请人从猪伪狂犬病阳性病料中筛选出最新流行毒株作为亲本毒株，之后反复传代，筛选，最终获得了一株自然随机的突变弱毒株JS18‑150，所述毒株的保藏编号为：CCTCC NO：V202390。该毒株是天然的缺失株，是一种自然随机的突变，相较于基因缺失株更稳定，不返毒，同时免疫原性好，生物安全性高，可更有效的预防当前流行的PRV变异毒株。
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公开(公告)号：CN114058646B
公开(公告)日：2023-11-03
申请号：CN202111329159.4
申请日：2021-11-10
申请人： 武汉科前生物股份有限公司
IPC分类号： C12N15/866 , C12N15/67 , C12N15/34 , C12P21/02 , C07K14/01 , C07K1/18 , A61K39/12 , A61P31/20
摘要： 本发明公开了一种表达PCV2d cap蛋白的载体及方法，使用Bac‑to‑Bac杆状病毒表达系统，通过对pFast Bac Dual载体进行改造，使用SV40启动子顺式作用元件、增加AcMNPV基因中同源重复序列(Hr1)、增加转录后调控元件(WPRE)改造pFast Bac Dual载体，PCV2d cap蛋白编码基因与pFast Bac Dual载体连接，将所得转移质粒转化DH10Bac大肠杆菌，通过转座重组，获得重组杆状病毒质粒，采用Sf9细胞培养和重组杆状病毒增殖，来提高PCV2cap重组蛋白的表达量。对Bac‑to‑Bac杆状病毒表达系统表达的目的蛋白浓度进一步提高，有助于提高制备PCV2d的抗原、抗体、或亚单位疫苗的生产效率和降低生产成本。
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公开(公告)号：CN116024268A
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN202211149440.4
申请日：2022-09-21
申请人： 武汉科前生物股份有限公司
IPC分类号： C12N15/867 , C12N15/34 , C12N7/04 , C12N5/10 , C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/68 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61P31/20 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种猪圆环病毒3型病毒样颗粒、亚单位疫苗及其制备方法与应用。构建方法包括以下步骤：(1)在pHBLV‑EF1‑MCS‑CMV‑ZsGreen‑T2A‑PURO载体上插入PCV3cap‑1基因；(2)用构建好的重组质粒与病毒包装质粒共转染293T细胞，得包装好的重组慢病毒液；(3)将包装好的重组慢病毒感染CHO细胞，通过嘌呤霉素初筛选，再通过流式分选细胞仪复筛，最后通过96孔板分选法，获得稳定高表达PCV3cap蛋白的单克隆细胞株。本发明利用重组慢病毒系统制备一种能稳定表达PCV3cap蛋白的单克隆细胞株，同时利用该细胞株表达的PCV3cap蛋白制备了重组亚单位疫苗，对预防猪圆环病毒3型病毒有重要意义。
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公开(公告)号：CN113136456A
公开(公告)日：2021-07-20
申请号：CN202110449294.6
申请日：2021-04-25
申请人： 武汉科前生物股份有限公司
摘要： 本发明涉及动物病疫检测领域，具体涉及一种鉴别猪伪狂犬病毒基因缺失疫苗株和野毒株的荧光定量PCR检测试剂盒。在本发明提供的检测试剂盒中，用于检测猪伪狂犬病毒gI/gE基因缺失情况的引物及探针如SEQ ID NO.1‑3所示。本发明提供的检测试剂盒中还包括，基于化学法修饰的热启动DNA聚合酶、dUTP/UNG防污染系统、抗PCR抑制物因子。本发明提供的检测试剂盒敏感性高，最低检测限为189copies/uL。本发明所述试剂盒适用于复杂的动物临床样本的检测。
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公开(公告)号：CN112662818A
公开(公告)日：2021-04-16
申请号：CN202110098665.0
申请日：2021-01-25
申请人： 武汉科前生物股份有限公司
摘要： 本发明提供一种基于PMA‑qPCR技术检测猪流行性腹泻病毒的方法。本发明所述方法采用PMA对病毒液进行预处理，使PMA与病毒RNA交联，提取病毒RNA反转录为cDNA，使用GreenI嵌合荧光法进行qPCR扩增，根据采集的荧光信号Ct值判断样品是否含有具有感染性的猪流行性腹泻病毒。本发明所述方法检测灵敏度较高、特异性强，并且能够有效排除非感染性病毒RNA的干扰，达到特异性检测具有感染性病毒的效果，可用于临床样品的快速检测。
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公开(公告)号：CN112280753A
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN202011147329.2
申请日：2020-10-23
申请人： 武汉科前生物股份有限公司
IPC分类号： C12N7/01 , C12N15/113 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
摘要： 本发明涉及一种伪狂犬病病毒TK、gE、gI和gG基因缺失株及其制备方法和应用。CRISPR/Cas9介导的同源重组技术具体为以CRISPR/Cas9为媒介将DNA双链断裂，后使用同源重组的方法，将转入细胞的同源序列补在缺口上，进行DNA双链修复，完成基因组的编辑，此技术可以按照研究者的意愿进行精确的定点编辑，大幅提高基因编辑的效率，缩短疫苗的研发周期。本发明采用此技术对伪狂犬病毒流行毒株的毒力相关基因TK、gE、gI以及免疫抑制相关基因gG的部分序列进行缺失得到TK、gE、gI和gG基因缺失株，该基因缺失株的疫苗具有安全性高、遗传稳定性和免疫保护效果好等优势。
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公开(公告)号：CN112280753B
公开(公告)日：2022-07-19
申请号：CN202011147329.2
申请日：2020-10-23
申请人： 武汉科前生物股份有限公司
IPC分类号： C12N7/01 , C12N15/113 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
摘要： 本发明涉及一种伪狂犬病病毒TK、gE、gI和gG基因缺失株及其制备方法和应用。CRISPR/Cas9介导的同源重组技术具体为以CRISPR/Cas9为媒介将DNA双链断裂，后使用同源重组的方法，将转入细胞的同源序列补在缺口上，进行DNA双链修复，完成基因组的编辑，此技术可以按照研究者的意愿进行精确的定点编辑，大幅提高基因编辑的效率，缩短疫苗的研发周期。本发明采用此技术对伪狂犬病毒流行毒株的毒力相关基因TK、gE、gI以及免疫抑制相关基因gG的部分序列进行缺失得到TK、gE、gI和gG基因缺失株，该基因缺失株的疫苗具有安全性高、遗传稳定性和免疫保护效果好等优势。
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公开(公告)号：CN114277188A
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN202111363670.6
申请日：2021-11-17
申请人： 武汉科前生物股份有限公司
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了一种荧光定量引物组和探针、检测猪圆环病毒2型病毒滴度的方法及应用。主要内容包括构建一对特异性引物鉴定PCV2病毒；制备不同滴度的PCV2病毒标准品进行TCID50的检测；对不同滴度病毒提取核酸进行荧光定量获取CT值；得到CT值与TCID50对应关系获取标准曲线；根据标准曲线鉴定病毒滴度及成品疫苗的滴度。传统检测病毒滴度的方法耗时，繁琐，不方便，本发明所提供的方法能够快速，简便，易操作鉴定病毒滴度；大大节省了实验耗材与时间。
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公开(公告)号：CN114058646A
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202111329159.4
申请日：2021-11-10
申请人： 武汉科前生物股份有限公司
IPC分类号： C12N15/866 , C12N15/67 , C12N15/34 , C12P21/02 , C07K14/01 , C07K1/18 , A61K39/12 , A61P31/20
摘要： 本发明公开了一种表达PCV2d cap蛋白的载体及方法，使用Bac‑to‑Bac杆状病毒表达系统，通过对pFast Bac Dual载体进行改造，使用SV40启动子顺式作用元件、增加AcMNPV基因中同源重复序列(Hr1)、增加转录后调控元件(WPRE)改造pFast Bac Dual载体，PCV2d cap蛋白编码基因与pFast Bac Dual载体连接，将所得转移质粒转化DH10Bac大肠杆菌，通过转座重组，获得重组杆状病毒质粒，采用Sf9细胞培养和重组杆状病毒增殖，来提高PCV2cap重组蛋白的表达量。对Bac‑to‑Bac杆状病毒表达系统表达的目的蛋白浓度进一步提高，有助于提高制备PCV2d的抗原、抗体、或亚单位疫苗的生产效率和降低生产成本。
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