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公开(公告)号:CN102426234B
公开(公告)日:2014-06-25
申请号:CN201210000614.0
申请日:2012-01-04
申请人: 潍坊科技学院 , 山东农业大学 , 山东省蔬菜工程技术研究中心
IPC分类号: G01N33/569 , G01N21/31
摘要: 本发明涉及基因工程中病毒检测技术领域一种快速准确检测番茄黄化曲叶病毒的方法:从病叶总DNA中克隆得到TYLCV-CP基因片段,与pET-32a连接转化受体菌,对阳性菌落诱导表达并纯化出目的蛋白;免疫家兔制备抗血清,对纯化的抗体进行碱性磷酸酶标记,使用DAS-ELISA方法对待检病株进行检测。本发明检测番茄黄化曲叶病毒的方法,其灵敏度高,可用于定性、定量分析,最低检测限为9.75ng/mL;操作简单快速,可在数小时内完成;特异性强,重复性好,针对番茄黄化曲叶病毒有非常明显的免疫学反应;可靠性高,其检出准确率与PCR法非常接近;检测成本低廉,试剂用量少并可以较长时间保存,非常适合大规模的常规检测。
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公开(公告)号:CN102426234A
公开(公告)日:2012-04-25
申请号:CN201210000614.0
申请日:2012-01-04
申请人: 潍坊科技学院 , 山东农业大学 , 山东省蔬菜工程技术研究中心
IPC分类号: G01N33/569 , G01N21/31
摘要: 本发明涉及基因工程中病毒检测技术领域一种快速准确检测番茄黄化曲叶病毒的方法:从病叶总DNA中克隆得到TYLCV-CP基因片段,与pET-32a连接转化受体菌,对阳性菌落诱导表达并纯化出目的蛋白;免疫家兔制备抗血清,对纯化的抗体进行碱性磷酸酶标记,使用DAS-ELISA方法对待检病株进行检测。本发明检测番茄黄化曲叶病毒的方法,其灵敏度高,可用于定性、定量分析,最低检测限为9.75ng/mL;操作简单快速,可在数小时内完成;特异性强,重复性好,针对番茄黄化曲叶病毒有非常明显的免疫学反应;可靠性高,其检出准确率与PCR法非常接近;检测成本低廉,试剂用量少并可以较长时间保存,非常适合大规模的常规检测。
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公开(公告)号:CN109487003A
公开(公告)日:2019-03-19
申请号:CN201811463014.1
申请日:2018-12-03
IPC分类号: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/94
摘要: 甜瓜坏死斑点病毒是甜瓜生产上危害较为严重的一种病毒。本发明旨在建立该病毒的逆转录环介导等温扩增检测方法,具有高度特异性,而且没有发现与其他病毒的交叉反应。通过与RT-PCR扩增结果比较发现RT-LAMP对MNSV的敏感性比普通RT-PCR的高103倍。该法具有高效、快速、灵敏等特点,非常适用于普通实验室和基层单位的病毒检测。
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公开(公告)号:CN104472544B
公开(公告)日:2017-05-10
申请号:CN201410749985.8
申请日:2014-12-10
申请人: 潍坊科技学院 , 寿光市农村能源服务中心 , 山东农业大学
摘要: 本发明属于蔬菜作物的栽培领域,具体涉及一种番茄茎部病害防治组合物,含有氢氧化铜可湿性粉剂和泥土,质量比1:15‑35。将氢氧化铜可湿性粉剂与泥土混匀,加入水,搅拌成药泥;将茎的病变部分剖开,刮去病变组织;将药泥均匀涂抺在茎的病害部位。用药次数减少,对发病植株通过一次用药可达到较好的防治效果;用药量减少,通过配制成药泥进行涂抺用药,用药种类和用药量大幅度减少,用药量仅为传统方法的20~30%;能显著提高工作效率,降低生产成本,省时省力;同时减少对作物及环境的污染,大大降低果实上喷溅的农药残留,有效延缓病害对农药产生抗性;可有效预防茎部病害的发生,减少病害的大面积流行,从而实现高产稳产。
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公开(公告)号:CN110592282A
公开(公告)日:2019-12-20
申请号:CN201910924691.7
申请日:2019-09-27
IPC分类号: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/94
摘要: 本发明提供基于RPA技术快速检测瓜类褪绿黄化病毒的引物对、试剂、试剂盒及其检测方法和应用。本发明通过设计检测瓜类褪绿黄化病毒的引物对,该引物对由引物RPA-CCYV-F和引物RPA-CCYV-R组成或由引物Q-CCYV-F和引物Q-CCYV-R组成。继而成功实现基于RPA技术对瓜类褪绿黄化病毒靶标基因的扩增,本发明检测方法为基于RPA技术,可用于特异性检测瓜类褪绿黄化病毒,该方法操作简便,灵敏度高,反应条件温和,反应时间短,能满足口岸和田间检测的基本需求。
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公开(公告)号:CN116426567A
公开(公告)日:2023-07-14
申请号:CN202310315394.9
申请日:2023-03-29
申请人: 潍坊科技学院 , 山东农业大学 , 山东省寿光蔬菜产业集团有限公司
摘要: 本发明提供了一种N基因及其蛋白在抗番茄黄化曲叶病毒中的应用,属于作物抗病技术领域。本发明为番茄黄化曲叶病毒病的防治提供了新的有效手段。本发明利用同源重组的方法分别构建N基因、NSm基因、NSs基因和GP基因的植物表达载体,然后分别与TYLCV侵染性克隆瞬时共侵染本氏烟,发现N基因引起TYLCV相对表达量下调的程度最为明显,下调幅度达39%。另将其3种蛋白和TYLCV以TYLCV+N+GP+NSm、TYLCV+N+GP、TYLCV+N+NSm、TYLCV+GP+NSm等组合分别瞬侵本氏烟后发现所有含N的处理对TYLCV均产生了明显的影响,为提高作物对番茄黄化曲叶病毒的抗性提供了一条有效途径。
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公开(公告)号:CN110592282B
公开(公告)日:2020-12-22
申请号:CN201910924691.7
申请日:2019-09-27
IPC分类号: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/94
摘要: 本发明提供基于RPA技术快速检测瓜类褪绿黄化病毒的引物对、试剂、试剂盒及其检测方法和应用。本发明通过设计检测瓜类褪绿黄化病毒的引物对,该引物对由引物RPA‑CCYV‑F和引物RPA‑CCYV‑R组成或由引物Q‑CCYV‑F和引物Q‑CCYV‑R组成。继而成功实现基于RPA技术对瓜类褪绿黄化病毒靶标基因的扩增,本发明检测方法为基于RPA技术,可用于特异性检测瓜类褪绿黄化病毒,该方法操作简便,灵敏度高,反应条件温和,反应时间短,能满足口岸和田间检测的基本需求。
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公开(公告)号:CN104472544A
公开(公告)日:2015-04-01
申请号:CN201410749985.8
申请日:2014-12-10
申请人: 潍坊科技学院 , 寿光市农村能源服务中心 , 山东农业大学
摘要: 本发明属于蔬菜作物的栽培领域,具体涉及一种番茄茎部病害防治组合物,含有氢氧化铜可湿性粉剂和泥土,质量比1:15-35。将氢氧化铜可湿性粉剂与泥土混匀,加入水,搅拌成药泥;将茎的病变部分剖开,刮去病变组织;将药泥均匀涂抺在茎的病害部位。用药次数减少,对发病植株通过一次用药可达到较好的防治效果;用药量减少,通过配制成药泥进行涂抺用药,用药种类和用药量大幅度减少,用药量仅为传统方法的20~30%;能显著提高工作效率,降低生产成本,省时省力;同时减少对作物及环境的污染,大大降低果实上喷溅的农药残留,有效延缓病害对农药产生抗性;可有效预防茎部病害的发生,减少病害的大面积流行,从而实现高产稳产。
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公开(公告)号:CN116426567B
公开(公告)日:2023-11-03
申请号:CN202310315394.9
申请日:2023-03-29
申请人: 潍坊科技学院 , 山东农业大学 , 山东省寿光蔬菜产业集团有限公司
摘要: 本发明提供了一种N基因及其蛋白在抗番茄黄化曲叶病毒中的应用,属于作物抗病技术领域。本发明为番茄黄化曲叶病毒病的防治提供了新的有效手段。本发明利用同源重组的方法分别构建N基因、NSm基因、NSs基因和GP基因的植物表达载体,然后分别与TYLCV侵染性克隆瞬时共侵染本氏烟,发现N基因引起TYLCV相对表达量下调的程度最为明显,下调幅度达39%。另将其3种蛋白和TYLCV以TYLCV+N+GP+NSm、TYLCV+N+GP、TYLCV+N+NSm、TYLCV+GP+NSm等组合分别瞬侵本氏烟后发现所有含N的处理对TYLCV均产生了明显的影响,为提高作物对番茄黄化曲叶病毒的抗性提供了一条有效途径。
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公开(公告)号:CN116083321B
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202310206724.0
申请日:2023-03-07
申请人: 潍坊科技学院
摘要: 本发明属于植物病毒防治技术领域,具体涉及一种短小芽孢杆菌F1‑3及其在植物病毒防治中的应用,该短小芽孢杆菌F1‑3已于2022年12月13日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址为中国.湖北.武汉大学,其保藏编号为:CCTCCNO:M 20221959;分类命名为:短小芽孢杆菌Bacilluspumilus。采用本发明的短小芽孢杆菌F1‑3对植物进行灌根处理或者叶面喷施处理后,能有效的降低烟粉虱传播番茄褪绿病毒和番茄黄化曲叶病毒的传毒率,可应用于番茄褪绿病毒和番茄黄化曲叶病毒的田间防控,作为番茄褪绿病毒和番茄黄化曲叶病毒的生物防治制剂用菌具有良好的应用前景。
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