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公开(公告)号：CN106460040B
公开(公告)日：2021-01-08
申请号：CN201580015896.3
申请日：2015-03-18
Applicant: 通用电气公司
IPC: C12Q1/6844 , C12P19/34
Abstract: 本文提供用于等温核酸扩增的方法和试剂盒，其使用靶向核酸模板；包含具有链替代活性的DNA聚合酶、脱氧核糖核苷三磷酸酯(dNTP)混合物、具有3’端和5’端的引物、分子拥挤剂和缓冲溶液的反应混合物，以便扩增所述靶向核酸模板。所述缓冲溶液维持所述反应混合物的低盐浓度，且其中所述盐浓度产生比反应温度低至少10℃的引物的熔融温度(Tm)。所述扩增在等温条件下进行。
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公开(公告)号：CN104583413B
公开(公告)日：2018-10-19
申请号：CN201380044858.1
申请日：2013-06-27
Applicant: 通用电气公司
IPC: C12P19/34
Abstract: 提供了扩增RNA模板的方法。所述方法包括使用第一反应混合物，将核糖核酸(RNA)模板逆转录以形成cDNA，所述第一反应混合物包含RNA模板、能够与RNA模板杂交的至少一种引物、逆转录酶和脱氧核苷三磷酸(dNTPs)；和使用第二反应混合物，扩增cDNA以形成扩增产物，所述第二反应混合物包含至少一种链置换DNA聚合酶、至少一种含肌苷的引物和能够在引物的肌苷残基的DNA 3'产生缺口的核酸酶。所述方法在等温条件下完成，无需使cDNA模板变性。也提供了定量测定样品中的RNA模板的方法和检测样品中的RNA模板的方法。也提供了用于自核糖核酸(RNA)模板扩增脱氧核酸(DNA)的试剂盒。
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公开(公告)号：CN110997922A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201880051940.X
申请日：2018-08-06
Applicant: 通用电气公司
Abstract: 提供了在无真核细胞的表达系统中使用双链多联体DNA用于体外转录和翻译的方法。该方法包括以下步骤：（a）使双链多联体DNA与无真核细胞的表达系统接触；和（b）在无真核细胞的表达系统中从双链多联体DNA在体外表达蛋白质。双链多联体DNA包括多个串联重复序列。多个串联重复序列包括表达序列，所述表达序列包括启动子、不依赖于帽的翻译元件（CITE）和开放读码框。无真核细胞的表达系统中的双链多联体DNA的最终浓度在约0.1 ng/μL至约35 ng/μL的范围内。RCA产物DNA可以用作用于该方法的双链多联体DNA。
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公开(公告)号：CN106460040A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201580015896.3
申请日：2015-03-18
Applicant: 通用电气公司
Abstract: 本文提供用于等温核酸扩增的方法和试剂盒，其使用靶向核酸模板；包含具有链替代活性的DNA聚合酶、脱氧核糖核苷三磷酸酯(dNTP)混合物、具有3’端和5’端的引物、分子拥挤剂和缓冲溶液的反应混合物，以便扩增所述靶向核酸模板。所述缓冲溶液维持所述反应混合物的低盐浓度，且其中所述盐浓度产生比反应温度低至少10℃的引物的熔融温度(Tm)。所述扩增在等温条件下进行。
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公开(公告)号：CN104583413A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201380044858.1
申请日：2013-06-27
Applicant: 通用电气公司
IPC: C12P19/34
CPC classification number: C12Q1/6853 , C12Q2521/301 , C12Q2525/101 , C12Q2527/101 , C12Q2521/101 , C12Q2521/107 , C12Q2531/119 , C12Q2537/101
Abstract: 提供了扩增RNA模板的方法。所述方法包括使用第一反应混合物，将核糖核酸(RNA)模板逆转录以形成cDNA，所述第一反应混合物包含RNA模板、能够与RNA模板杂交的至少一种引物、逆转录酶和脱氧核苷三磷酸(dNTPs)；和使用第二反应混合物，扩增cDNA以形成扩增产物，所述第二反应混合物包含至少一种链置换DNA聚合酶、至少一种含肌苷的引物和能够在引物的肌苷残基的DNA 3'产生缺口的核酸酶。所述方法在等温条件下完成，无需使cDNA模板变性。也提供了定量测定样品中的RNA模板的方法和检测样品中的RNA模板的方法。也提供了用于自核糖核酸(RNA)模板扩增脱氧核酸(DNA)的试剂盒。
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