公开(公告)号：CN101422620A

公开(公告)日：2009-05-06

申请号：CN200810050899.2

申请日：2008-06-30

Applicant: 吉林大学

Inventor： 张西臣 ,  李建华 ,  于钦磊 ,  宫鹏涛 ,  张国才 ,  杨举 ,  李淑红

IPC: A61K48/00 ,  A61K39/002 ,  C12N15/30 ,  C12N15/79 ,  A61P33/02

CPC classification number: Y02A50/489

Abstract: 本发明提供一种微小隐孢子虫双价核酸疫苗及制备工艺，以真核表达载体pVAX1为载体，将两个微小隐孢子虫保护性抗原基因联合CPG免疫加强序列串联插入到pVAX1真核表达载体的多克隆位点区，获得了含免疫加强序列的微小隐孢子虫双价核酸疫苗。选用了两个保护性抗原基因进行了双价核酸疫苗的研制，并在此基础上引入了CPG免疫加强序列，以增强其免疫保护效果。本发明疫苗具有较强的细胞免疫和体液免疫作用，并且引入的CPG基序又具有激活免疫系统，诱导天然免疫应答，分泌免疫球蛋白和各种细胞因子的作用，两者优势组合，从而可以达到更好的预防动物微小隐孢子虫病的目的。

公开(公告)号：CN101234196A

公开(公告)日：2008-08-06

申请号：CN200710056370.7

申请日：2007-11-30

Applicant: 吉林大学

Inventor： 李建华 ,  张西臣 ,  王秋悦 ,  宫鹏涛 ,  杨举

IPC: A61K39/012 ,  C12N15/66 ,  A61P33/02

Abstract: 本发明提供一种球虫重组卡介苗，包括穿梭表达载体球虫重组卡介苗和整合表达载体球虫重组卡介苗疫苗。卡介苗活载体疫苗本身具有较强的细胞免疫和体液免疫佐剂作用，能高效表达球虫蛋白，使表达的蛋白发挥很好的免疫保护作用，两者优势组合，达到更好的预防鸡球虫病的目的。疫苗具有非常好的抗球虫效果，热稳定性好，运输和保存较为容易；免疫力持久，单次接种可持续诱导长期对“靶抗原”的免疫反应，可减少接种次数，简化免疫程序，增强对球虫病的免疫效果；基因操作和生产过程较为简单，安全性高，球虫抗原可在BCG细胞壁上持续稳定表达；产品不需纯化，可直接用于免疫保护试验，免去了蛋白质后处理的复杂工序，大大降低了成本，便于推广。

公开(公告)号：CN119265334A

公开(公告)日：2025-01-07

申请号：CN202411798492.3

申请日：2024-12-09

Applicant: 吉林大学

Inventor： 张西臣 ,  韩铭书 ,  张楠 ,  王晓岑 ,  李建华 ,  宫鹏涛 ,  李新 ,  张旭

IPC: C12Q1/6893 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明适用于生物学检测技术领域，提供了一种检测泰泽隐孢子虫的引物探针组合物、试剂盒及方法，引物探针组合物包括上游引物、下游引物和探针，上游引物、下游引物和探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.3所示。本发明在实际应用于实验小鼠感染泰泽隐孢子虫的检测中具有切实的实际意义，降低了对检测设备的依赖，缩短了检测时长，同时确保了检测结果的精准性。对临床样品的测试结果显示，经39℃扩增30min后，将扩增产物滴加至试纸条上，短时间内即可获得结果，且对泰泽隐孢子虫卵囊的最低检出限达到10‑2个。在拥有良好的特异性的同时，该检测方法还实现了检测过程的快速高效以及检测结果的直观可视化。

公开(公告)号：CN119242834A

公开(公告)日：2025-01-03

申请号：CN202411553609.1

申请日：2024-11-02

Applicant: 吉林大学

Inventor： 李新 ,  李超凡 ,  李建华 ,  张园园 ,  王晓岑 ,  张旭 ,  张滢 ,  许玥琪 ,  宫鹏涛 ,  张楠 ,  张西臣

IPC: C12Q1/6893 ,  C12Q1/6883 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种基于RPA‑PfAgo的贾第虫可视化检测系统及其应用，通过优化反应体系和反应条件，提高了RPA‑PfAgo扩增的效率、灵敏度和特异性；与CRISPR/Cas9系统相比，整个操作过程更加简单，PfAgo和gDNA的合成成本更低，且稳定性更好，易于储存和运输，更加适用于现场检测；整个反应仅需39℃的RPA扩增和95℃的PfAgo切割反应，通过水浴或金属浴即可完成，不需要专业的温控设备，根据使用的探针可以通过蓝光激发直接观察样本中是否存在贾第虫，极大的减少了所需的时间和设备成本，操作方法简单，对人员专业性要求不高，更加适合现场的诊断。

公开(公告)号：CN114774565B

公开(公告)日：2024-10-18

申请号：CN202210331156.2

申请日：2022-03-30

Applicant: 吉林大学

Inventor： 宫鹏涛 ,  李珊 ,  曹松高 ,  姜维娜 ,  李建华 ,  张西臣 ,  于艳辉 ,  曹利利 ,  李新 ,  王晓岑

IPC: C12Q1/6893 ,  C12Q1/6804 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/90

Abstract: 本发明公开了一种基于RPA‑CRISPR‑Cas12a体系可视化检测阴道毛滴虫的试剂盒及方法，所述试剂盒包含一对用于扩增阴道毛滴虫actin基因的特异性RPA引物对、用于CRISPRCas12a反应的crRNA、荧光报告基团、侧向流免疫层析报告基团和Cas12/13通用侧流层析试纸条，以及用于CRISPR反应的缓冲液和Cas12a蛋白，用于扩增阴道毛滴虫actin基因的特异性RPA引物对的核苷酸序列如SEQIDNO:11和16所示，用于CRISPRCas12a反应的crRNA互补的DNA的核苷酸序列如SEQIDNO:5所示；该方法快速、可视，且特异性好，敏感度高，可作为一种临床检测阴道毛滴虫的工具，对设备要求较低，特别适用于大规模人群筛查，为公共卫生机构的监测提供良好的技术手段。

公开(公告)号：CN118340874A

公开(公告)日：2024-07-16

申请号：CN202410464621.9

申请日：2024-04-17

Applicant: 吉林大学

Inventor： 张西臣 ,  张涛 ,  张楠 ,  程淑琴 ,  李建华 ,  宫鹏涛 ,  王晓岑 ,  李新

IPC: A61K39/012 ,  A61P33/02 ,  C12N15/62 ,  C12N15/81 ,  C07K14/455

Abstract: 本发明公开一种鸡球虫免疫增强型四价重组OLSA亚单位疫苗及制备方法，将外源基因与表达载体共同整合到毕赤酵母的染色体中，确保了基因在细胞分裂中的稳定传递，避免了基因丢失；可将外源蛋白分泌到培养基中，简便了蛋白纯化过程；并且表达的重组蛋白与天然蛋白在生理、生化功能上非常接近；与活疫苗相比，避免了散毒及高成本等问题；制备的免疫增强型四价重组OLSA亚单位疫苗，含有重组IL‑2蛋白，可以有效抵抗柔嫩艾美尔球虫、毒害艾美尔球虫、堆型艾美尔球虫和巨型艾美尔球虫四种球虫的感染；除感染毒害艾美耳球虫外，感染其余球虫后，ACI均可达到180以上。

公开(公告)号：CN116590447A

公开(公告)日：2023-08-15

申请号：CN202310759450.8

申请日：2023-06-26

Applicant: 吉林大学

Inventor： 张楠 ,  陈雪娇 ,  张西臣 ,  李建华 ,  宫鹏涛 ,  王晓岑 ,  李新 ,  张旭 ,  张洪波

IPC: C12Q1/6893 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种鼠三毛滴虫可视化LFD‑RPA试剂盒及制备方法，以鼠三毛滴虫16S rRNA基因为靶基因，设计并筛选特异性引物及探针，建立鼠三毛滴虫LFD‑RPA的可视化快速核酸检测方法，RPA等温扩增原理结合侧流层析试纸条建立鼠三毛滴虫感染核酸检测技术，建立了一种检测鼠三毛滴虫的可视化快速敏感方法，不依赖大型仪器，实现快速、易操作的检测。

公开(公告)号：CN116466074A

公开(公告)日：2023-07-21

申请号：CN202310270980.6

申请日：2023-03-20

Applicant: 吉林大学

Inventor： 宫鹏涛 ,  李利君 ,  张西臣 ,  曹利利 ,  李建华 ,  刘娟 ,  王晓岑 ,  李新 ,  张楠

IPC: G01N33/543 ,  G01N33/558 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开了基于特异性抗原FHH的肝片吸虫胶体金检测方法，该检测方法采用肝片吸虫特异性抗原基因FHH、FHH蛋白、胶体金颗粒、金黄色葡萄球菌蛋白A标记的胶体金颗粒和检测试纸条进行检测。该方法具有简单快速、结果可视、成本低廉、且高特异性高灵敏性等优点。其中通过肝片吸虫成虫cDNA表达文库筛选所得的抗原基因FHH，保证了本发明的特异性。适用于临床快速诊断以及大规模的流行病学调查。

公开(公告)号：CN116254349A

公开(公告)日：2023-06-13

申请号：CN202211646024.5

申请日：2022-12-20

Applicant: 吉林大学

Inventor： 宫鹏涛 ,  黄陶钧 ,  曹利利 ,  姜维娜 ,  曹松高 ,  李建华 ,  张西臣 ,  王晓岑 ,  李新 ,  张楠

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/682 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了基于RPA‑CRISPR/Cas12a系统的华支睾吸虫可视化快速检测试剂盒及方法，试剂盒包括：一对用于扩增华支睾吸虫COX‑1基因保守序列的特异性RPA引物、Cas12a蛋白、用于CRISPR/Cas12a反应的缓冲液、crRNA、荧光报告基团、侧向流免疫层析报告基团以及Cas12/13通用侧向流免疫层析试纸条。其中，所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO:10和15所示，用于CRISPR/Cas12a反应的crRNA互补的DNA核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示；本发明快速、灵敏、特异性良好且结果肉眼可视，可作为一种临床检测华支睾吸虫感染的方法，对实验设备要求较低，尤其适合在野外环境进行快速、准确的检测，为基层监控和诊断华支睾吸虫病提供了良好的技术手段。

公开(公告)号：CN116200515A

公开(公告)日：2023-06-02

申请号：CN202310019682.X

申请日：2023-01-06

Applicant: 吉林大学

Inventor： 张楠 ,  张洪波 ,  张西臣 ,  李建华 ,  宫鹏涛 ,  王晓岑 ,  李新

IPC: C12Q1/6893 ,  C12Q1/6848 ,  C12N15/11 ,  C12R1/90

Abstract: 本发明公开一种鼠三毛滴虫基因检测特异引物及用途，以鼠三毛滴虫SSU rRNA基因部分序列为目标序列，设计的两对特异性引物为鼠三毛滴虫的基因检测特异引物，本发明所述的引物进行nested PCR只有鼠三毛滴虫扩增出特异基因即384bp片段，不与十二指肠贾第虫、泰泽微小隐孢子虫、大肠杆菌、人五毛滴虫、阴道毛滴虫等发生交叉反应，可以区分不同的毛滴虫种类，解决了目前尚无区分毛滴虫种类方法的问题。利用本发明的引物进行nested PCR可检测到100个鼠三毛滴虫虫体的DNA，可检测到感染鼠三毛滴虫小鼠粪便基因组DNA浓最低度为0.1ng/μL。