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公开(公告)号：CN118374440A
公开(公告)日：2024-07-23
申请号：CN202410576309.9
申请日：2024-05-10
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种高效、稳定的从不同年龄和部位的猪体中分离成纤维细胞的方法。该方法利用组织块贴壁法进行原代培养，并且优化了细胞的生长环境和营养供应，提高了成纤维细胞的活性和纯度。本发明还涉及细胞的体外传代培养和增殖分化能力验证，确保所得成纤维细胞适合细胞培养肉的生产。通过本发明，可获得高增殖能力的成纤维细胞，且这些细胞在体外表现出细胞外基质相关基因的特异性表达，对提高细胞培养肉的生产效率和质量具有重要作用。
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公开(公告)号：CN114645012B
公开(公告)日：2022-11-29
申请号：CN202210403310.2
申请日：2022-04-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/0775 , C12N5/077 , C12N5/071 , A23L13/00
Abstract: 本发明提供一种基于食品级定向支架材料的细胞培养肉的生产方法，包括如下步骤：S1、将胶原蛋白配置成水分散液，利用模具固定水凝胶的形状，通过酶促的成胶方式，促进溶质分子形成网络结构稳定、机械性能良好的水凝胶；S2、将步骤S1制备的水凝胶置于具有良好导热性能的金属板上，通过接触金属板传递来自液氮的热量使得水凝胶梯度降温，从而实现其内部冰晶快速定向生长；S3、将步骤S2制备的具有定向结构的水凝胶进行真空冷冻干燥，形成具有定向排列孔道的支架材料；S4、将步骤S3制备的支架材料接种细胞悬液，待细胞沉积贴附于支架材料上后，补充添加增殖培养液，细胞增殖达到预分化密度时更换分化培养液；S5、收获细胞培养肉，进行食品化处理。
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公开(公告)号：CN114990056B
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202210695711.X
申请日：2022-06-20
Applicant: 南京周子未来食品科技有限公司 , 南京农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明提供一种高纯度猪脂肪祖细胞的分离纯化方法，包括如下步骤：采集猪脂肪组织，漂洗，消化，得到含有猪脂肪祖细胞的单核细胞悬液；取含有脂肪祖细胞的单核细胞悬液，离心、细胞筛过滤、裂解、贴壁培养，取贴壁细胞即为含有猪脂肪祖细胞的单核细胞群；将猪脂肪祖细胞的单核细胞群进行流式分选，先选取出CD31和CD45阴性的细胞，再从前述细胞中选取出CD29和CD140a阳性的细胞，即为纯化后的猪脂肪祖细胞。应用本发明的纯化方法，可以稳定的获得高纯度的猪脂肪祖细胞。分离得到的猪脂肪祖细胞具有高效的分化效率。应用本发明的方法，可以为培养脂肪研究和实际生产提供大量的种子细胞来源。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114958730A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202210429466.8
申请日：2022-04-22
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明提供一种肌肉干细胞增殖培养基、分化培养基及其应用。包括添加有3，2’‑二羟基黄酮的肌肉干细胞增殖培养基，添加有槲皮素的肌肉干细胞分化培养基。采用肌肉干细胞增殖培养基在体外短期培养猪肌肉干细胞时增殖速度显著提高，培养3天得到的细胞数量是正常培养基的1.35倍；在肌肉干细胞分化培养基中诱导分化5天，细胞的分化能力显著上升，肌肉特异性表蛋白肌球蛋白重链表达量显著上升。本发明还提供所述培养基的应用，以及基于本发明所述培养基制备培养肉的方法，提高肌肉干细胞在体外短期培养的扩增数量及分化能力，有利于培养肉的生产。
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公开(公告)号：CN113862225A
公开(公告)日：2021-12-31
申请号：CN202111169385.0
申请日：2021-10-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N5/0775 , C12N15/867 , C12N15/66 , C12N15/12 , C12N15/54
Abstract: 本发明提供一种用于培养肉种子细胞体外扩大培养的改良培养基以及基因操作方法。改良后的培养基添加有靶向Hippo‑YAP通路的激活剂、抑制剂，其能够在高密度条件下促进肌肉干细胞增殖并维持干性基因表达。基因操作方法指对Hippo‑YAP通路的关键元件进行敲低、敲除、过表达等基因操作，可促进高密条件下肌肉干细胞的增殖和干性维持。改良培养基以及基因操作方法有助于体外大量扩增功能性肌肉干细胞，较好地满足培养肉生产对于种子细胞的大规模需求。
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公开(公告)号：CN112708591A
公开(公告)日：2021-04-27
申请号：CN202011558188.3
申请日：2020-12-24
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明提供一种用于肌肉干细胞体外分化的化学成分明确的培养基，即肌肉干细胞体外诱导分化的无血清的更高效、廉价的化学成分明确的培养基。该化学成分明确的培养基相较于现有的一般肌肉干细胞分化培养基，在分化第2天能够提高MYOG基因的相对表达量4.48倍，在分化第6天提高MYHC基因的相对表达量55.28倍，在终末分化阶段的细胞分化百分比从34.94％提高到57.93％，存在极显著差异，并且诱导分化形成的肌纤维更多、更粗、更长。该化学成分明确分化培养基的发明，进一步提高了肌肉干细胞的分化效率，为肌肉干细胞更高效地分化成肌管，为3D培养肌肉干细胞生产细胞培养肉提供了更高效、廉价的方法。
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公开(公告)号：CN217879010U
公开(公告)日：2022-11-22
申请号：CN202221331749.0
申请日：2022-05-31
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本实用新型公开了一种用于检测细胞培养肉pH值的电极装置，其包括中空结构的电极支持杆以及分别设置于电极支持杆上下两端的电极插座和平面电极，电极插座外设有用于显示pH值得显示屏，电极插座内部设有连接在一起的电源和参比电极，参比电极通过导线与平面电极连接，所述导线位于电极支持杆内。使用时将平面电极贴在细胞培养肉表面，使用能指示培养肉pH值的平面玻璃电极作为指示电极，用甘汞电极作参比电极，两个电极组成一个电池，贴在培养肉的表面，由指示电极与参比电极组成的电池会产生电动势，电动势与培养肉的pH有直接关系，由能斯特方程即可计算出培养肉的pH，显示在电极插座表面，实现快速检测细胞培养肉的pH值。
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公开(公告)号：CN211394496U
公开(公告)日：2020-09-01
申请号：CN201921875316.X
申请日：2019-11-03
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12M3/00 , C12N5/0775 , C12N5/077
Abstract: 本实用新型涉及一种多孔的网状培养肉生产模具。该生产模具包括外壁，第一凹槽，第二凹槽和由若干微柱规律排布组成的微柱阵列。所述第一凹槽设置在外壁内侧，所述第二凹槽设置在第一凹槽内部；所述第二凹槽底部设置若干个微柱，所述若干个微柱规律排布形成微柱阵列。微柱阵列的设计考虑了后期混合凝胶压实过程中的力学变化，增强营养物质向细胞的扩散，并通过控制机械张力的空间格局来引导局部的三维细胞排列，促进分化过程。第二凹槽是培养肉肌肉组织的培养空间。第一凹槽的设计有利于阳模脱模过程，还可以扩大培养液的使用量，促进营养物质的交换。利用该模具，可以生产获得较大的网状培养肉肌肉组织。(ESM)同样的发明创造已同日申请发明专利
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