一种从经血中分离宫内膜间充质干细胞的方法

    公开(公告)号:CN108034634A

    公开(公告)日:2018-05-15

    申请号:CN201711371272.2

    申请日:2017-12-19

    IPC分类号: C12N5/0775

    CPC分类号: C12N5/0668 C12N2509/00

    摘要: 本发明提供了一种从月经血中快速高效分离宫内膜间充质干细胞的方法,所述方法为:收集月经血离心除去上层血浆,沉淀a中加入溶液Ⅰ,迅速混匀后,静置1~3分钟,而后加入溶液Ⅱ,混匀后离心,去上清液,获得的沉淀b用培养液悬浮,接种至细胞培养瓶中,48h后换液,除去未贴壁细胞,而后每2~3天换液,长至90%汇合时,消化传代,收集P3代细胞,即为纯化的EnMSCs。利用本发明方法所得EnMSCs在纯度方面与传统方法相比无差异,但本发明所述方法制备时间更短,分离过程耗时不超过15min,本方法所用分离试剂成分简单可控,操作方便,在降低制备成本的同时也提高了安全性。

    一种NK细胞的体外扩增方法
    13.
    发明公开

    公开(公告)号:CN117089519A

    公开(公告)日:2023-11-21

    申请号:CN202311035204.4

    申请日:2023-08-16

    IPC分类号: C12N5/0783 C12N5/078

    摘要: 本发明提供了一种NK细胞的体外扩增方法,该方法包括:S1、将外周血单个核细胞用含有自体血浆和CD3抗体的第一培养基重悬,得到第一细胞悬液;S2、将所述第一细胞悬液接种至培养瓶中,并且进行培养,得到第一培养物;所述第一培养基中的自体血浆为所述外周血单个核细胞对应的自体血浆。利用该方法进行NK细胞培养能够可提高体外扩增外周血NK比例,且不降低扩增效率和NK细胞的杀伤效率。

    一种提取DNA的方法和解离染色质的方法以及高氯酸盐的用途

    公开(公告)号:CN105385676B

    公开(公告)日:2018-10-02

    申请号:CN201510751602.5

    申请日:2015-11-05

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明提供了一种解离染色质的方法,该方法包括:将含有染色质的样品与解离剂混合;其中,所述解离剂含有高氯酸锂。本发明还提供了一种提取DNA的方法,其中,该方法包括如下步骤:(1)将含有染色质的样品与解离剂混合均匀,得到解离后的物料;(2)将所述解离后的物料与蛋白抽提液混合均匀,分离得到蛋白抽提后的上清液;(3)将所述蛋白抽提后的上清液与DNA沉淀剂混合,得到DNA沉淀;其中,所述解离剂含有高氯酸锂。本发明还提供了一种高氯酸盐在提取DNA中的用途,其中,所述高氯酸盐为高氯酸锂。本发明的方法具有重复性好,稳定性高的优点,同时避免了蛋白酶K法需要较高温度加热及长时间消化的劣势。

    一种提高脂肪组织中CD34阳性血管基质成分提取率的方法

    公开(公告)号:CN106337036A

    公开(公告)日:2017-01-18

    申请号:CN201610730476.X

    申请日:2016-08-26

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明公开了一种提高脂肪组织中CD34阳性血管基质成分(SVF)提取率的方法,所述方法为:将脂肪组织用生理盐水混悬,离心去除油层后,将沉淀重复离心,取最后一次离心获得的沉淀破碎,获得破碎组织,然后向破碎组织中加入胶原酶水溶液,37℃振荡消化,消化结束后,离心,取沉淀即为CD34阳性血管基质成分。本发明所述方法能够用低浓度的胶原酶消化,从脂肪组织中获取含高比率CD34阳性干/祖细胞的SVF。CD34阳性干/祖细胞比率:在SVF中占比大于24%,每毫升脂肪组织可获得大于6.0×105个CD34阳性细胞。

    一种NKT细胞的体外扩增方法
    18.
    发明公开

    公开(公告)号:CN116875546A

    公开(公告)日:2023-10-13

    申请号:CN202311046992.7

    申请日:2023-08-16

    IPC分类号: C12N5/0783 C12N5/078

    摘要: 本发明提供了一种NKT细胞的体外扩增方法,该方法包括:S1、将外周血单个核细胞用含有自体血浆的第一培养基重悬,得到第一细胞悬液;S2、将所述第一细胞悬液接种至预包被培养瓶中,并且进行培养,得到第一培养物;所述第一培养基中的自体血浆为所述外周血单个核细胞对应的自体血浆;所述预包被培养瓶包括培养瓶本体和附着在所述培养瓶本体内壁上的预包被层,所述预包被层中含有CD16单抗和结冷胶。利用该方法进行NKT细胞培养能够弥补部分细胞因重力而造成的贴壁问题,提高NKT细胞的诱导效率,进而提高NKT细胞的比例。

    外泌体的制备方法和培养基及其应用

    公开(公告)号:CN115216442A

    公开(公告)日:2022-10-21

    申请号:CN202211078325.2

    申请日:2022-09-05

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明提供了一种外泌体的制备方法和培养基及其应用,涉及外泌体制备的技术领域。该制备方法包括采用丝裂霉素C处理分泌外泌体的细胞。该制备方法可以实现在不改变细胞的代次的情况下,多次获得细胞的外泌体,从而提高了外泌体的产量。缓解了现有技术中存在的,在制备外泌体时,每个代次内仅能收集一次外泌体导致的产量低的技术问题。