外泌体的制备方法和培养基及其应用

    公开(公告)号:CN115216442B

    公开(公告)日:2024-04-16

    申请号:CN202211078325.2

    申请日:2022-09-05

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明提供了一种外泌体的制备方法和培养基及其应用,涉及外泌体制备的技术领域。该制备方法包括采用丝裂霉素C处理分泌外泌体的细胞。该制备方法可以实现在不改变细胞的代次的情况下,多次获得细胞的外泌体,从而提高了外泌体的产量。缓解了现有技术中存在的,在制备外泌体时,每个代次内仅能收集一次外泌体导致的产量低的技术问题。

    用于荧光定量PCR检测菌体数量的核酸试剂和试剂盒以及方法和用途

    公开(公告)号:CN115851989A

    公开(公告)日:2023-03-28

    申请号:CN202210946229.9

    申请日:2022-08-08

    摘要: 本公开提供了一种用于荧光定量PCR检测菌体数量的核酸试剂,所述核酸试剂包括16SrRNA基因保守区域引物对;所述16SrRNA基因保守区域引物对包括如SEQ ID NO.1所示的16SrRNA基因正向引物和SEQ ID NO.2所示的16SrRNA基因反向引物。本公开还提供了一种用于荧光定量PCR检测菌体数量的试剂盒,其中,所述试剂盒包括如上所述的核酸试剂以及PCR扩增试剂。本公开还提供了一种荧光定量PCR检测菌体数量的方法。本公开还提供了如上所述的核酸试剂在制备用于检测菌体数量的试剂盒中的用途。通过上述技术方案,本公开实现了对可能存在多种微生物污染的样本的高灵敏度地检测,并为细胞制剂无菌快检领域提供了一种有效的检测方法。

    一种从经血中分离宫内膜间充质干细胞的方法

    公开(公告)号:CN108034634B

    公开(公告)日:2021-01-12

    申请号:CN201711371272.2

    申请日:2017-12-19

    IPC分类号: C12N5/0775

    摘要: 本发明提供了一种从月经血中快速高效分离宫内膜间充质干细胞的方法,所述方法为:收集月经血离心除去上层血浆,沉淀a中加入溶液Ⅰ,迅速混匀后,静置1~3分钟,而后加入溶液Ⅱ,混匀后离心,去上清液,获得的沉淀b用培养液悬浮,接种至细胞培养瓶中,48h后换液,除去未贴壁细胞,而后每2~3天换液,长至90%汇合时,消化传代,收集P3代细胞,即为纯化的EnMSCs。利用本发明方法所得EnMSCs在纯度方面与传统方法相比无差异,但本发明所述方法制备时间更短,分离过程耗时不超过15min,本方法所用分离试剂成分简单可控,操作方便,在降低制备成本的同时也提高了安全性。

    脂肪组织冻存液及脂肪组织冻存方法

    公开(公告)号:CN106465710A

    公开(公告)日:2017-03-01

    申请号:CN201610696833.5

    申请日:2016-08-19

    IPC分类号: A01N1/02

    摘要: 本发明涉及生物医药技术领域,具体涉及一种脂肪组织冻存液及脂肪组织冻存方法。所述冻存液含有体积百分数为4%~6%的二甲基亚砜、质量百分数为0.5%~10%的羟乙基淀粉以及质量百分数为10%~20%的人血白蛋白。所述冻存方法包括:1)、对脂肪组织样本清洗后将其移入装有缓冲液的离心管中离心;2)、将脂肪组织移至新的离心管内并剪成碎块,加缓冲液并离心;3)、将脂肪组织移出并与预冷的脂肪组织冻存液混合得到混合液,将所述混合液冷冻后移入液氮中保存。

    脂肪组织冻存液及脂肪组织冻存方法

    公开(公告)号:CN106465710B

    公开(公告)日:2020-04-14

    申请号:CN201610696833.5

    申请日:2016-08-19

    IPC分类号: A01N1/02

    摘要: 本发明涉及生物医药技术领域,具体涉及一种脂肪组织冻存液及脂肪组织冻存方法。所述冻存液含有体积百分数为4%~6%的二甲基亚砜、质量百分数为0.5%~10%的羟乙基淀粉以及质量百分数为10%~20%的人血白蛋白。所述冻存方法包括:1)、对脂肪组织样本清洗后将其移入装有缓冲液的离心管中离心;2)、将脂肪组织移至新的离心管内并剪成碎块,加缓冲液并离心;3)、将脂肪组织移出并与预冷的脂肪组织冻存液混合得到混合液,将所述混合液冷冻后移入液氮中保存。

    一种富血小板血浆和提取富血小板血浆的方法

    公开(公告)号:CN110538196A

    公开(公告)日:2019-12-06

    申请号:CN201910745517.6

    申请日:2019-08-13

    摘要: 本发明提供了一种提取富血小板血浆的方法和用该方法制得的取富血小板血浆,该方法主要包括以下步骤:将抗凝处理后的全血进行第一离心,得到第一离心产物;将第一离心产物红细胞层上段的0-5mm与血浆层和白膜层取出,得到取出的第一浓集物和剩余的第二浓集物;将第一浓集物进行第二次离心,得到第二离心产物;弃掉第二离心产物血浆层的50-75%的上段,得到剩余的第三浓集物;将第二浓集物用生理盐水稀释后进行冻融处理,并将冻融处理后的物料用生理盐水洗涤并离心,将离心所得的沉淀作为第四浓集物;将第三浓集物与第四浓集物混合。该方法人为操作误差小,显著提升了富血小板血浆中血小板得率。

    一种牛腱来源的高纯度胶原蛋白海绵的制备方法

    公开(公告)号:CN109602943A

    公开(公告)日:2019-04-12

    申请号:CN201811567676.3

    申请日:2018-12-20

    摘要: 本发明属于医学生物材料技术领域,具体涉及一种以动物跟腱为原材料制作Ⅰ型胶原海绵的方法,其主要特征在于制备的胶原海绵是以三螺旋结构的形式存在。利用酸膨胀—胃蛋白酶降解的新方法提取低免疫原性的胶原蛋白,再利用盐析及透析等纯化方法得到高蛋白含量、高纯度的Ⅰ型胶原蛋白。最后利用交联、冻干成型、数次清洗、二次冻干及辐照灭菌等过程得到具有一定机械强度、有一定的透湿性、具有适宜的孔径与孔隙率以及无菌的三维结构的医用胶原蛋白海绵。本发明获得的高纯度Ⅰ型胶原蛋白海绵,可广泛应用于医药领域(如组织修复)。