公开(公告)号：CN106986928B

公开(公告)日：2020-04-24

申请号：CN201710242953.2

申请日：2017-04-14

申请人： 江苏恒瑞医药股份有限公司

发明人： 张晨光 ,  王宏伟 ,  孙金星 ,  汪军 ,  王亚里 ,  孔祥林 ,  封海莹

IPC分类号： C07K14/535 ,  C07K1/36 ,  C07K1/34 ,  C07K1/18

摘要： 本发明涉及一种聚乙二醇化重组人粒细胞刺激因子的纯化方法。具体而言，本发明优化了阳离子交换色谱分离纯化PEG‑G‑CSF，并进行适当的缓冲液置换制备PEG‑G‑CSF原液的方法，通过一步柱层析纯化并置换缓冲液即可获得HPLC、电泳纯度均在98％以上的PEG‑G‑CSF。本发明纯化工艺不仅简化了工艺路线，节省了生产时间，并且蛋白回收率高，获得的蛋白原液纯度高，加入适当的药用辅料即可制备成药物制剂，十分适合大规模工业化放大生产。

公开(公告)号：CN108368512A

公开(公告)日：2018-08-03

申请号：CN201780004772.4

申请日：2017-04-17

申请人： 江苏恒瑞医药股份有限公司

发明人： 喻馗 ,  王宏伟 ,  田静 ,  曾翔 ,  孔祥林

IPC分类号： C12N15/70 ,  C12N15/27 ,  C12N1/21 ,  C07K1/107 ,  C12R1/19

摘要： 提供了一种重组人粒细胞集落刺激因子的制备方法，其中采用的cDNA是在人源序列基础上根据大肠杆菌密码子偏好性修改而得到的，其在大肠杆菌工程菌中表达量高。

公开(公告)号：CN106986928A

公开(公告)日：2017-07-28

申请号：CN201710242953.2

申请日：2017-04-14

申请人： 江苏恒瑞医药股份有限公司

发明人： 张晨光 ,  王宏伟 ,  孙金星 ,  汪军 ,  王亚里 ,  孔祥林 ,  封海莹

IPC分类号： C07K14/535 ,  C07K1/36 ,  C07K1/34 ,  C07K1/18

摘要： 本发明涉及一种聚乙二醇化重组人粒细胞刺激因子的纯化方法。具体而言，本发明优化了阳离子交换色谱分离纯化PEG‑G‑CSF，并进行适当的缓冲液置换制备PEG‑G‑CSF原液的方法，通过一步柱层析纯化并置换缓冲液即可获得HPLC、电泳纯度均在98％以上的PEG‑G‑CSF。本发明纯化工艺不仅简化了工艺路线，节省了生产时间，并且蛋白回收率高，获得的蛋白原液纯度高，加入适当的药用辅料即可制备成药物制剂，十分适合大规模工业化放大生产。

公开(公告)号：CN108368512B

公开(公告)日：2020-03-27

申请号：CN201780004772.4

申请日：2017-04-17

申请人： 江苏恒瑞医药股份有限公司

发明人： 喻馗 ,  王宏伟 ,  田静 ,  曾翔 ,  孔祥林

IPC分类号： C12N15/70 ,  C12N15/27 ,  C12N1/21 ,  C07K1/107 ,  C12R1/19

摘要： 提供了一种重组人粒细胞集落刺激因子的制备方法，其中采用的cDNA是在人源序列基础上根据大肠杆菌密码子偏好性修改而得到的，其在大肠杆菌工程菌中表达量高。

公开(公告)号：CN107417787A

公开(公告)日：2017-12-01

申请号：CN201710362500.3

申请日：2017-05-22

申请人： 江苏恒瑞医药股份有限公司

发明人： 孙宜锋 ,  王宏伟 ,  孔祥林 ,  尹子波 ,  刘衍伟 ,  袁亚菲 ,  喻馗

IPC分类号： C07K14/64 ,  C12N15/16 ,  C12N15/81 ,  A61K38/22 ,  A61P15/04

摘要： 本发明涉及一种人松弛素2类似物的制备方法。具体的，重组人松弛素2类似物的前体带有一种特殊的新型连接肽，使其前体具有增强的折叠稳定性而显著提高分泌表达效率。在连接肽两端与松弛素肽A-链和B-链两个连接点处分别带有切割位点，其前体在真菌细胞中表达后在细胞内运输过程中被切割，从而使细胞向培养基中分泌正确表达、成熟的双链人松弛素2类似物。