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公开(公告)号：CN116064425A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202211611788.0
申请日：2022-12-14
Applicant: 中国农业科学院都市农业研究所 , 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/869 , C12N15/38 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于病毒基因工程技术领域，公开了TK基因缺失的重组猪伪狂犬病毒（PRV）的感染性克隆系统，所述感染性克隆系统包括5个Fosmid，分别为Fos‑Bartha‑1、Fos‑Bartha‑2‑dTK、Fos‑Bartha‑3‑dTK、Fos‑Bartha‑4和Fos‑Bartha‑5，其中Fos‑Bartha‑2‑dTK和Fos‑Bartha‑3‑dTK是通过将Fos‑Bartha‑2和Fos‑Bartha‑3中的TK基因缺失得来。利用本发明的TK基因缺失多片段感染性克隆系统构建重组PRV效率高、对小鼠无致病性，为今后的PRV Bartha‑K61疫苗载体及基因工程载体研究奠定了重要基础。
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公开(公告)号：CN114236128B
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202111449947.7
申请日：2021-11-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 中国农业科学院都市农业研究所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535 , C07K14/165 , C07K16/10 , C12N15/70 , C12N15/50
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种检测猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白抗体的阻断ELISA试剂盒。该试剂盒包括：包被有猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白的酶标板、HRP标记的鼠抗猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白单克隆抗体、阳性血清对照、阴性血清对照。该试剂盒最低能检出1:512稀释的阳性血清，并且与PEDV、TGEV和PDCoV等阳性血清无交叉反应，批内和批间重复变异系数小于10%。与间接免疫荧光试验的对比结果显示，本发明阻断ELISA试剂盒检测的符合率为99.6%，Kappa值为0.91，本发明建立的阻断ELISA方法与IFA高度一致。该方法操作简便、快速，可用于检测猪急性腹泻综合征冠状病毒抗体临床样本。
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公开(公告)号：CN114287389A
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN202111534568.8
申请日：2021-12-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 中国农业科学院都市农业研究所
IPC: A01K67/027 , A61K49/00
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种猪急性腹泻综合征病毒感染小鼠模型构建方法及其应用。该方法采用颅内注射方式将猪急性腹泻综合征病毒感染7日龄以内小鼠，得到猪急性腹泻综合征病毒感染小鼠模型。采用本发明方法建立的SADS‑CoV感染小鼠模型，攻毒后实验小鼠临床症状清晰、典型、可重复性高，与新生猪感染的临床症状一致，可用于SADS‑CoV相关疾病的致病机制和免疫机理研究，以及抗病毒药物和疫苗的研发，有助于防控SADS‑CoV引起的疾病。
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公开(公告)号：CN114088941A
公开(公告)日：2022-02-25
申请号：CN202111183767.9
申请日：2021-10-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 中国农业科学院都市农业研究所
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种检测猪急性腹泻综合征冠状病毒的双抗体夹心ELISA试剂盒。本发明的检测猪急性腹泻综合征冠状病毒的双抗夹心ELISA试剂盒，包括：包被有兔抗SADS‑CoV N蛋白多克隆抗体的酶标板、HRP标记的鼠抗SADS‑CoV N蛋白单克隆抗体。还包括酶标二抗、封闭液、稀释液、洗涤液、显色液以及终止液。本发明所建立的双抗体夹心ELISA试剂盒具有较好的特异性、敏感性、批内和批间重复性。该试剂盒最低病毒的检出量为10‑4.42TCID50/0.1mL，并且不与PEDV、TGEV和PDCoV反生反应，批内和批间重复变异系数小于10%。与RT‑PCR方法比较，本发明双抗夹心ELISA试剂盒检测的符合率为93.93％。本发明所建立的SADS‑CoV抗原双抗体夹心ELISA检测方法具有良好的敏感性、特异性和重复性，能用于SADS‑CoV的临床检测。
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