一种马铃薯病毒的快速灵敏检测方法

    公开(公告)号:CN103757138B

    公开(公告)日:2015-02-25

    申请号:CN201410034605.2

    申请日:2014-01-25

    Inventor: 丁铭 卢训 张仲凯

    Abstract: 本发明公开了一种云南马铃薯主栽品种丽薯6号、云薯401、宣薯2号病株中马铃薯Y病毒、马铃薯X病毒、马铃薯A病毒和马铃薯卷叶病毒4种病毒的检测方法。本发明通过对云南马铃薯主栽品种丽薯6号、云薯401、宣薯2号病株中马铃薯Y病毒、马铃薯X病毒、马铃薯A病毒和马铃薯卷叶病毒4种特异性混合抗体诱捕病样中病毒,不必提取样品总RNA进行随机引物逆转录和特异性病毒引物复合PCR反应。本方法将快速、特异的免疫沉淀与灵敏的复合RT-PCR结合,同时设置健康马铃薯随机引物cDNA产物和相应病毒PCR特异片段阳性质粒作为阴、阳性对照,从而快速、准确、灵敏的应用于检测田间马铃薯植株样品、抗病毒材料及田间环境疑似侵染源等方面。

    一种定量检测植物病毒的荧光免疫斑点法

    公开(公告)号:CN103760346A

    公开(公告)日:2014-04-30

    申请号:CN201410034665.4

    申请日:2014-01-25

    Inventor: 丁铭 卢训 张仲凯

    CPC classification number: G01N33/56983 G01N33/582

    Abstract: 本发明公开了一种定量检测植物病毒的荧光免疫斑点法,是将待测样品研磨,制备检测样品上样液,配制阳性、阴性及空白对照上样液,测出阳性对照上样液的病毒粒体平均数d。将2.0~2.5μl检测样品上样液、阳性、阴性及空白对照上样液分别点在硝酸纤维素膜上,将膜干燥后封闭0.8~1.2h,依次加入稀释后的一抗、二抗,分别反应0.8~1.2h,每次反应后洗膜3~4次,每次5~6min。将膜稍干燥后置于荧光分光光度计中检测荧光强度m,按照下述公式计算检测样品上样液中待检测病毒的粒体平均数d。阳性对照上样液m值:阳性对照上样液d值=检测样品上样液m值:检测样品上样液d值。所述方法能够实现植物病毒的灵敏准确、快捷高效的定量分析,推广应用价值较高。

    一种马铃薯病毒的快速灵敏检测方法

    公开(公告)号:CN103757138A

    公开(公告)日:2014-04-30

    申请号:CN201410034605.2

    申请日:2014-01-25

    Inventor: 丁铭 卢训 张仲凯

    CPC classification number: C12Q1/70 C12Q1/6804 C12Q2531/113 C12Q2545/101

    Abstract: 本发明公开了一种云南马铃薯主栽品种丽薯6号、云薯401、宣薯2号病株中马铃薯Y病毒、马铃薯X病毒、马铃薯A病毒和马铃薯卷叶病毒4种病毒的检测方法。本发明通过对云南马铃薯主栽品种丽薯6号、云薯401、宣薯2号病株中马铃薯Y病毒、马铃薯X病毒、马铃薯A病毒和马铃薯卷叶病毒4种特异性混合抗体诱捕病样中病毒,不必提取样品总RNA进行随机引物逆转录和特异性病毒引物复合PCR反应。本方法将快速、特异的免疫沉淀与灵敏的复合RT-PCR结合,同时设置健康马铃薯随机引物cDNA产物和相应病毒PCR特异片段阳性质粒作为阴、阳性对照,从而快速、准确、灵敏的应用于检测田间马铃薯植株样品、抗病毒材料及田间环境疑似侵染源等方面。

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