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公开(公告)号：CN117214429A
公开(公告)日：2023-12-12
申请号：CN202210583818.5
申请日：2022-05-26
Applicant: 南京大学
IPC: G01N33/569 , G01N21/76
Abstract: 本发明涉及一种免洗型SARS‑CoV‑2N抗原化学发光检测方法和试剂盒。所述化学发光检测方法包括4个试剂加入步骤：步骤1，待测样品加入含有一对抗体‑DNA偶联物、双链DNA探针、环形模板DNA、phi29聚合酶和脱氧核糖核苷三磷酸的反应试剂1中进行识别反应；步骤2，继续加入含有Cu2+的反应试剂2进行反应；步骤3，再加入含有抗坏血酸钠和辣根过氧化物酶的反应试剂3进行反应；步骤4，同时加入有鲁米诺配置的底物液1和有过氧化氢配置的底物液2，产生化学发光信号。最后根据化学发光信号强度对所述待测样品中的SARS‑CoV‑2N抗原进行定量检测。该检测方法和试剂盒灵敏、便捷，可应用于COVID‑19的筛查和诊断。
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公开(公告)号：CN106980022B
公开(公告)日：2023-07-07
申请号：CN201710234646.X
申请日：2017-04-07
Applicant: 南京大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 一种基于靶标蛋白诱导DNA酶循环生成的均相免疫分析方法，该方法的检测溶液包括抗体1‑DNA1偶联物、抗体2‑DNA2偶联物、血红素hemin、核酸外切酶III和DNA3/DNA4双链DNA。当靶标蛋白存在时，可被抗体1‑DNA1和抗体2‑DNA2同时免疫识别，基于邻位效应，DNA1与DNA2会进行杂交而后与双链DNA上的DNA3发生链取代反应，进而释放出富含G序列的DNA4与hemin结合形成G‑四链体/hemin DNA酶，此外，与DNA1和DNA2反应的DNA3能被核酸外切酶III识别并切断，使得DNA1和DNA2可与另一个DNA3发生链取代反应，从而释放另一个DNA4生成DNA酶，如此循环，生成大量的DNA酶。该DNA酶可催化TMB显色和鲁米诺发光，通过比色或化学发光成像的方法可对靶标蛋白进行灵敏的定量分析。该方法操作简单、快速、灵敏、普适性高，具有一定的临床应用价值。
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公开(公告)号：CN115960160A
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN202111189719.0
申请日：2021-10-12
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明涉及一种活细胞膜整合素αvβ3聚糖的原位糖链延长方法。通过偶联αvβ3的特异性识别多肽(Pep)和半乳糖氧化酶(GAO)，构建聚糖重构探针Pep‑GAO。在K4[Fe(CN)6]存在下，酶活性被抑制的Pep‑GAO可以结合活细胞表面的整合素αvβ3，然后加入K3[Fe(CN)6]激活GAO，使其氧化αvβ3糖链末端的半乳糖或N‑乙酰半乳糖胺，生成可以发生生物正交反应的醛基。该基团可与酰肼功能化的糖分子发生连接反应，生成腙键，从而实现αvβ3上糖链的延长。该方法在活细胞水平上实现了对特定蛋白聚糖结构的编辑，为细胞膜蛋白聚糖的功能研究和活体聚糖调控提供了有力的工具。
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公开(公告)号：CN115896246A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202111104670.4
申请日：2021-09-22
Applicant: 南京大学
IPC: C12Q1/682
Abstract: 本发明公开了基于水凝胶微球的单细胞多组分核酸荧光定量分析方法，包括制备多种靶标核酸分子识别捕获探针；采用微流控芯片制备包裹单细胞且负载捕获探针的水凝胶微液滴；经紫外光照水凝胶微液滴固化成水凝胶微球，捕获探针被共价结合在水凝胶微球骨架上；细胞裂解，靶标核酸分子从细胞中释放，被捕获探针识别并原位引发催化发卡自组装反应，放大靶标核酸分子信号；经滚环扩增反应对靶标核酸分子信号二次放大；引入荧光标记的报告序列，对滚换扩增产物荧光标记；通过共聚焦断层扫描对水凝胶微球中的靶标核酸分子引起的荧光信号定量检测。本发明适用于共聚焦断层扫描荧光定量检测和流式细胞术检测，有望用于大量细胞单细胞多组分核酸荧光定量分析。
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公开(公告)号：CN111718708B
公开(公告)日：2021-11-16
申请号：CN201910211108.8
申请日：2019-03-20
Applicant: 南京大学
Abstract: 一种中继式纳米稀土上转换发光材料及中继式蛋白酶活性检测方法，属于蛋白质检测领域。该方法主要通过构建基于可以进行中继式能量转移的纳米稀土上转换发光探针实现，具体的以纳米稀土上转换发光颗粒作为核心，在纳米颗粒表面直接连接的可以吸收上转换纳米探针发射光的中继层染料，以及末端修饰可以与中继层染料形成共振能量转移基团的多肽底物。在近红外激发光照射下，加入能够与多肽底物进行反应的蛋白酶，进行蛋白酶活性的检测。该蛋白酶检测方法检测灵敏高、普适性高，具有一定的临床应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112451485A
公开(公告)日：2021-03-09
申请号：CN202011420002.8
申请日：2020-12-07
Applicant: 南京大学
IPC: A61K9/107 , A61K41/00 , A61K47/34 , A61K31/704 , A61P35/00
Abstract: 本发明涉及一种短时间近红外光照响应的纳米胶束的制备方法及其在药物快速释放中的应用。该方法利用亲水性聚乙二醇以及疏水性供体受体Stenhouse加合物(DASA)形成两亲性聚合物链P‑DASA，制备了包覆有Er3+掺杂上转换纳米粒子(UCNPs)以及抗癌药物阿霉素的纳米胶束。在近红外光照下，UCNPs发射的绿光(541nm)促使疏水性的DASA转变为亲水性，导致胶束解体并释放阿霉素，仅仅5分钟的光照(808nm，2W/cm2)刺激后，药物在30min内达到80％以上的释放率。本发明提供了一种短时间光照激活的近红外光控药物释放体系，对于上转换纳米材料在药物载运以及癌症精准诊疗领域的临床应用和发展有着重要的意义。
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公开(公告)号：CN111735801A
公开(公告)日：2020-10-02
申请号：CN201910226079.2
申请日：2019-03-25
Applicant: 南京大学
IPC: G01N21/64 , C12Q1/6813
Abstract: 本发明涉及一种基于水凝胶的HCR和阳离子交换反应的荧光分析方法，通过硅烷化反应在基片表面修饰C-C双键，利用紫外光引发的自由基聚合反应借助光掩膜在基片上构建PEG水凝胶阵列。目标分子打开修饰在水凝胶上的捕获探针的发卡结构，引发生物素化发卡H1、H2间的杂交链反应，在传感位点形成长串双链DNA。通过生物素-链霉亲和素特异结合反应，将生物素化的量子点CdS固定到传感位点。通过Ag+引发CdS发生阳离子交换反应，Cd2+使得Rhod-5N的荧光极大增强。利用基因芯片扫描仪对阵列点荧光进行定量，从而实现目标分子的高灵敏高特异性分析。本发明方法操作简单、成本低、灵敏度高、特异性好、普适性高。
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公开(公告)号：CN109870433A
公开(公告)日：2019-06-11
申请号：CN201711272434.7
申请日：2017-12-01
Applicant: 南京大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明涉及一对用于细胞表面神经节苷脂定量筛查的浮力微球探针及其制备方法。该浮力微球探针包含提取探针和收集探针。提取探针以马来酰亚胺修饰的二氧化硅浮力微球为基底，在其上共价结合具有核酸内切酶切割位点和硼酸末端的DNA分子。通过硼酸与细胞表面唾液酸的共价识别作用，提取探针可以将细胞表面包含唾液酸的生物分子通过浮力提取。在核酸内切酶的作用下，被提取的生物分子可以被释放到溶液中，并由十八烷硅烷化的收集探针通过疏水作用收集其中的结合有核酸碎片的神经节苷脂，进一步利用体外杂交链反应对神经节苷脂进行荧光定量。
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公开(公告)号：CN106980022A
公开(公告)日：2017-07-25
申请号：CN201710234646.X
申请日：2017-04-07
Applicant: 南京大学
IPC: G01N33/68
CPC classification number: G01N33/68
Abstract: 本发明涉及一种基于靶标蛋白诱导DNA酶循环生成的均相免疫分析方法。该免疫分析方法的检测溶液包括抗体1‑DNA1偶联物、抗体2‑DNA2偶联物、血红素hemin、核酸外切酶III和DNA3/DNA4双链DNA。当靶标蛋白存在时，可被抗体1‑DNA1偶联物和抗体2‑DNA2偶联物同时免疫识别，基于邻位效应，DNA1与DNA2进行杂交形成复合物，而后与双链DNA上的DNA3发生链取代反应，进而释放出富含G序列的DNA4与hemin结合形成G‑四链体/hemin DNA酶，此外，与DNA1和DNA2反应的DNA3能被核酸外切酶III识别并切断，使得DNA1和DNA2可与另一个DNA3发生链取代反应，从而释放另一个DNA4生成DNA酶，如此循环，生成大量的DNA酶。该DNA酶可催化TMB显色和鲁米诺发光，通过比色或化学发光成像的方法可对靶标蛋白进行灵敏的定量分析。该免疫分析方法操作简单、快速、灵敏、普适性高，具有一定的临床应用价值。
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公开(公告)号：CN104328192A
公开(公告)日：2015-02-04
申请号：CN201410623931.7
申请日：2014-11-05
CPC classification number: C12Q1/6804 , C12Q2525/301 , C12Q2565/607 , C12Q2563/137
Abstract: 本发明涉及一种核酸酶放大的高灵敏电化学免疫分析方法。通过Au-S键合作用，在金电极表面自组装亚甲基蓝(MB)标记的发夹DNA，构成电化学免疫传感界面。以Mg2+、DNA1-抗体1、DNA2-抗体2、DNA3-抗体3的混合溶液为检测液，在目标蛋白质存在时，抗体1、抗体2、抗体3同时识别目标蛋白质形成免疫复合物，使得DNA1、DNA2与DNA3相互靠近进行邻位杂交，形成Mg2+依赖性核酸酶，进而催化裂解传感界面上的发夹DNA，导致MB脱离电极表面，氧化电流减小。通过检测MB电流的变化，实现对目标蛋白质浓度的测定。该免疫分析方法利用三个DNA-抗体偶合物邻位形成核酸酶放大检测信号，提高了检测灵敏度和选择性，同时可对目标蛋白质进行快速、一步化检测，具有很好的临床应用价值。
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