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公开(公告)号：CN108018305A
公开(公告)日：2018-05-11
申请号：CN201711255197.3
申请日：2017-12-01
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用香蕉穿孔线虫伴生细菌介导的香蕉穿孔线虫防治方法。首先提供了一种构建伴生细菌介导的香蕉穿孔线虫生防工程菌的方法，是将具有杀线虫活性的生物酶的编码基因转化入香蕉穿孔线虫伴生细菌构建得到工程菌。然后利用该工程菌防治香蕉穿孔线虫，实现了通过伴生细菌介导表达杀线虫蛋白酶来防治香蕉穿孔线虫的目的。本发明获得的经遗传改造的荧光假单胞菌工程菌遗传稳定性好、对香蕉穿孔线虫的防控效果显著，商业化生产难度低；把活体菌和菌体次生代谢产物这两类生防因子有效地结合起来，充分发挥活体菌不断自我扩繁和自动扩散的特性以及代谢产物高效杀虫的活性，是一种安全、高效、稳定和可持续防治植物寄生线虫新方法和新途径。
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公开(公告)号：CN108018232A
公开(公告)日：2018-05-11
申请号：CN201711257591.0
申请日：2017-12-01
Applicant: 华南农业大学
Inventor： 谢辉 , 王东伟 , 陈德强 , 丁善文 , 其他发明人请求不公开姓名
Abstract: 本发明公开了一种具有遗传改造潜力的香蕉穿孔线虫伴生细菌。该伴生细菌为荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）pf36，于2017年11月8日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：60278。本发明从香蕉穿孔线虫多个种群中分离筛选出一株优势伴生细菌，即上述荧光假单胞菌pf36，其与香蕉穿孔线虫具有非常稳定的伴生关系，为杀线虫蛋白酶基因的介导表达提供了一种遗传改良目标菌，由于该目标菌与香蕉穿孔线虫的伴生关系，被改良表达杀线虫蛋白酶基因后，可用于香蕉穿孔线虫的生物防治，而且对作物安全。本发明也为植物线虫的防治提供了一种新的思路和方法，即利用线虫伴生菌介导杀线虫蛋白酶基因实现对线虫的生物防治。
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公开(公告)号：CN104823979A
公开(公告)日：2015-08-12
申请号：CN201510257428.9
申请日：2015-05-18
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及黄酮类化合物theaflavanoside II在防治植物线虫病害上的应用，黄酮类化合物theaflavanoside II的结构如式(1)所示。化合物(1)所述的黄酮类化合物theaflavanoside II对植物线虫具有强毒杀活性，对南方根结线虫卵的孵化有很强抑制活性，对南方根结线虫二龄幼虫、对短体线虫各龄期线虫、对水稻干尖线虫各龄期线虫均有强毒杀活性。本发明所述的黄酮类化合物theaflavanoside II来源于天然植物中，在环境中易于降解，因此与化学杀线剂相比，具有低毒低残留的特性，与环境的相容性更好，符合绿色植保和可持续农业生产和发展的需要。
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公开(公告)号：CN103014157B
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201210518233.1
申请日：2012-12-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种用单条线虫虫体或单个线虫虫卵鉴定植物寄生线虫的方法，属于分子生物学检测鉴定技术领域。在分子生物学实验中由于线虫个体小，在提取单条线虫DNA模板的过程中存在容易混入其它试剂污染或者将单条线虫切断处理过程中易发生材料损失严重。本发明包含了一步直接在PCR管中简单刺破线虫虫体或虫卵的操作，不需要进行把线虫裂解液从其它载体转移到PCR管中，这样保证了线虫及其裂解物的存在，即DNA模板的存在，模板制备效率高。本发明对目前在植物寄生线虫鉴定研究等多个方面的分子诊断标记进行了PCR验证和部分进一步的酶切实验验证，效果显著。本发明还首次公布了用单个线虫虫卵作为模板进行植物寄生线虫的鉴定。
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公开(公告)号：CN103014157A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201210518233.1
申请日：2012-12-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种用单条线虫虫体或单个线虫虫卵鉴定植物寄生线虫的方法，属于分子生物学检测鉴定技术领域。在分子生物学实验中由于线虫个体小，在提取单条线虫DNA模板的过程中存在容易混入其它试剂污染或者将单条线虫切断处理过程中易发生材料损失严重。本发明包含了一步直接在PCR管中简单刺破线虫虫体或虫卵的操作，不需要进行把线虫裂解液从其它载体转移到PCR管中，这样保证了线虫及其裂解物的存在，即DNA模板的存在，模板制备效率高。本发明对目前在植物寄生线虫鉴定研究等多个方面的分子诊断标记进行了PCR验证和部分进一步的酶切实验验证，效果显著。本发明还首次公布了用单个线虫虫卵作为模板进行植物寄生线虫的鉴定。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102972355A
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201210518077.9
申请日：2012-12-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: A01K67/033 , A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种利用甘薯愈伤组织繁殖培养和保存植物寄生线虫的方法。本发明通过以下步骤实现：新鲜甘薯经洗净、表面消毒、削皮和切片放入培养皿后在培养箱中培养获得甘薯愈伤组织；取经消毒处理的植物寄生线虫接种到甘薯愈伤组织上；分别放在各自适宜温度的培养箱中黑暗培养繁殖；培养一段时间后，将植物寄生线虫连同甘薯愈伤组织于4～20℃保存。本发明方法可实现即简单、大量人工培养繁殖植物寄生线虫，又能长期保存植物寄生线虫资源的目的。
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公开(公告)号：CN101419169A
公开(公告)日：2009-04-29
申请号：CN200810025752.8
申请日：2008-01-11
Applicant: 华南农业大学 , 天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
Abstract: 本发明公开了一种运用实时荧光PCR技术鉴定剪股颖粒线虫(Anguina agrostis)的方法，利用剪股颖粒线虫特异性DNA序列，用生物信息学方法设计特异性引物和特异性探针，探针的5'端标记报告荧光基团，3'端标记淬灭荧光基团，应用荧光PCR法扩增剪股颖粒线虫靶基因，通过探针在反应过程中荧光信号的变化鉴定样品中是否含有剪股颖粒线虫。本发明不受虫龄和虫体数量的影响，较形态学和形态测量学鉴定方法更为快速、准确；操作简单，可标准化，解决了快速鉴定剪股颖粒线虫的标准方法的问题，大大节约了检测时间，加快了口岸草种的验放速度，促进了进出口贸易，节约了货物因长期在货场存放而产生的费用。
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公开(公告)号：CN116286908A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310333064.2
申请日：2023-03-31
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种香蕉穿孔线虫分支酸变位酶及其应用。本发明提供了香蕉穿孔线虫分支酸变位酶基因RsCM在防治香蕉穿孔线虫中的应用，所述的香蕉穿孔线虫分支酸变位酶基因RsCM，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。通过烟草瞬时表达表明，RsCM能显著抑制flg22诱导的防卫基因表达和胼胝质沉积，能显著抑制BAX诱导的细胞坏死，说明RsCM能抑制植物的防卫反应；通过in planta RNAi技术构建转基因番茄，接种线虫后发现香蕉穿孔线虫致病力下降。本发明为农业生产中的线虫防治提供一条新的策略，为抗线虫品种植物的培育提供了新靶标，为香蕉穿孔线虫的防治提供了新途径。
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公开(公告)号：CN111670716B
公开(公告)日：2022-04-19
申请号：CN202010735913.3
申请日：2020-07-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: A01G7/06 , A01G31/00 , A01G24/12 , A01K67/033
Abstract: 本发明提供了一种模拟相似穿孔线虫与烟草互作模式的方法，涉及生物学技术领域；通过在光照培养箱内，对沙培的本氏烟草(Nicotiana benthamiana)进行相似穿孔线虫的接种，利用染色观察法观察相似穿孔线虫在根系内侵染的位置，通过侵染根系产生的症状计算严重度，然后统计总线虫数与初始接种量的差异计算繁殖倍率和完成生活史情况。本发明选用本氏烟草作为寄主研究相似穿孔线虫对其的寄生性和致病性，并探究最优的线虫致病条件，为利用本氏烟草研究相似穿孔线虫与寄主互作机制提供研究基础。
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公开(公告)号：CN106135143B
公开(公告)日：2020-02-04
申请号：CN201610684090.X
申请日：2016-08-18
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用胡萝卜纯愈伤组织培养繁殖无菌香蕉穿孔线虫的方法。该方法是在无菌条件下，将香蕉穿孔线虫依次用过氧化氢溶液消毒和氧氟沙星溶液浸泡处理后，接种于无菌胡萝卜纯愈伤组织上，封口黑暗培养；所述无菌胡萝卜纯愈伤组织是在无菌条件下，将培育的胡萝卜纯愈伤组织切成小颗粒块，浸泡于含有氯霉素和万古霉素的溶液中消毒，再点种于植物组织培养基上，黑暗培养所得。本方法可稳定、高效、快速地培养繁殖大量无菌香蕉穿孔线虫，能够提供符合要求的充足无菌虫源，而且处理条件温和可控，对线虫生物活性和繁殖力影响小，使用操作更加安全，该方法具有很好的推广应用前景。
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