一种快速检测蜜蜂丝状病毒的检测引物组、检测试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN106939356B

    公开(公告)日:2020-07-07

    申请号:CN201710278715.7

    申请日:2017-04-25

    发明人: 张祎 韩日畴

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/6844 C12N15/11

    摘要: 本发明公开了一种快速检测蜜蜂丝状病毒的检测引物组、检测试剂盒和检测方法。本发明针对蜜蜂丝状病毒ATPase特异性靶基因设计和筛选了一套特异性检测引物组以及含有该检测引物组的检测试剂盒和利用该检测试剂盒通过环介导等温扩增的检测方法,进而确定待检测样品中是否存在蜜蜂丝状病毒的检测方法。本发明的检测试剂盒和检测方法具有灵敏度高、特异性强、准确率好、检测时间短的优点,从样品处理到报告结果只需花4h,不需要PCR仪和电泳仪,操作过程简单,比其他PCR技术具有更高的特异性。特别适合蜜蜂病原调查与疾病防控使用。

    一株中国被毛孢及其应用
    22.
    发明公开

    公开(公告)号:CN110305795A

    公开(公告)日:2019-10-08

    申请号:CN201910198974.8

    申请日:2019-03-15

    发明人: 曹莉 韩日畴

    摘要: 本发明公开了一株中国被毛孢及其应用。中国被毛孢(Ophiocordyceps sinensis)KD11-2,其保藏编号为GDMCC No:60594。本发明的中国被毛孢(Ophiocordyceps sinensis)KD11-2能在人工培养基上长出子实体并形成子囊果(子囊孢子),具有形成子囊孢子的突出能力,因此,可以在人工培育条件下,利用中国被毛孢KD11-2生产并收集中国被毛孢子囊孢子。本发明将促进中国被毛孢子实体的人工培育,为利用所获得的子囊孢子感染冬虫夏草寄主蝙蝠蛾幼虫提供新的方法。

    一种狄斯瓦螨入侵行为分析装置及狄斯瓦螨对中蜂与意蜂幼虫入侵偏好性分析的方法

    公开(公告)号:CN109644944A

    公开(公告)日:2019-04-19

    申请号:CN201811326490.9

    申请日:2018-11-08

    发明人: 李文峰 韩日畴

    IPC分类号: A01K67/033

    CPC分类号: A01K67/033

    摘要: 本发明公开了一种狄斯瓦螨入侵行为分析装置及狄斯瓦螨对中蜂与意蜂幼虫入侵偏好性分析的方法。所述的狄斯瓦螨入侵行为分析装置包括培养皿,所述的培养皿包括培养皿底和培养皿盖,在所述的培养皿底圆形底面的两条相互垂直的直径上,距圆心等间距固定有4个蜜蜂育王台基,所述的培养皿底侧壁的高度大于蜜蜂育王台基的高度,所述的培养皿底内装有与蜜蜂育王台基等高度的蜂蜡,所述的培养皿底中心处的蜂蜡上设有孔槽。本发明的狄斯瓦螨入侵行为分析装置的制作难度低、制备时间短,从而有效控制生产成本,有利于其推广应用。另外,因主要制作材料(纯蜂蜡)的高度可塑性,使得本发明的狄斯瓦螨入侵行为分析装置具有良好的进一步改造和重复利用的潜能。

    一种快速恢复Steinernema longicaudum感染期幼虫的方法

    公开(公告)号:CN109548758A

    公开(公告)日:2019-04-02

    申请号:CN201811536242.7

    申请日:2018-12-14

    发明人: 吕欣 颜珣 韩日畴

    IPC分类号: A01K67/033

    CPC分类号: A01K67/033

    摘要: 本发明公开了一种快速恢复Steinernema longicaudum感染期幼虫的方法。将S.longicaudum感染期幼虫接种到人工卵液中,感染期幼虫恢复,收集恢复的线虫;所述的人工卵液含有柞蚕蛹血淋巴、海藻糖、鸡蛋黄、脱脂奶粉、N’s盐溶液和水。S.longicaudum感染期幼虫在人工卵液中恢复最快,且比例最高,1d后恢复率已接近68%,因此可以应用本发明的方法快速高效的恢复S.longicaudum感染期幼虫,从而为高效快速的培养S.longicaudum线虫提供条件。

    一种冬虫夏草菌液体培养基及高效获得冬虫夏草寄主昆虫感染用芽生孢子的方法

    公开(公告)号:CN108739050A

    公开(公告)日:2018-11-06

    申请号:CN201810513326.2

    申请日:2018-05-25

    IPC分类号: A01G18/00

    摘要: 本发明公开了一种冬虫夏草菌液体培养基及高效获得冬虫夏草寄主昆虫感染用芽生孢子的方法。所述的冬虫夏草菌液体培养基,每升含有土豆150~300g、蛋白胨10~30g、麦芽糖20~40g、硫酸镁0.5~1.5g、磷酸二氢钾1.5~30g、维生素B120~30g、大蜡螟幼虫研磨液5~10g,余量为水。本发明的冬虫夏草菌液体培养基和高效获得冬虫夏草寄主昆虫感染用芽生孢子的方法大大缩短了获得芽生孢子的培养时间,可以得到大量冬虫夏草寄主昆虫感染用芽生孢子,为冬虫夏草人工培育产业化发展提供技术支撑。

    一种快速获得小卷蛾斯氏线虫整齐龄期感染期幼虫的方法

    公开(公告)号:CN105831019B

    公开(公告)日:2018-10-23

    申请号:CN201610257254.0

    申请日:2016-04-21

    发明人: 颜珣 韩日畴

    IPC分类号: A01K67/033

    摘要: 本发明公开了一种快速获得小卷蛾斯氏线虫整齐龄期感染期幼虫的方法。将怀有成熟卵的怀卵雌虫加入纯水中孵育,获得整齐龄期感染期幼虫。本发明的快速获得小卷蛾斯氏线虫整齐龄期感染期幼虫的方法,能使卵不经过成虫阶段直接发育成感染期幼虫,从而直接从小卷蛾斯氏线虫母体中获得感染期幼虫,极大地缩短了获得整齐感染期幼虫的时间,为应用RNAi研究昆虫病原线虫环境抗性相关基因功能和对昆虫病原线虫进行基因改造提供了基础。

    一种长期贮存昆虫病原线虫的方法

    公开(公告)号:CN106962324A

    公开(公告)日:2017-07-21

    申请号:CN201710297024.1

    申请日:2017-04-28

    IPC分类号: A01N1/02 C05G3/02

    CPC分类号: A01N1/021 C05F11/02 C05G3/02

    摘要: 本发明公开了一种长期贮存昆虫病原线虫的方法。包括以下步骤:将线虫泥与腐殖土按照质量比1:0.8~1.2混合均匀,然后将混合物分装到容器中,用透气封口膜封口后进行贮存;所述的线虫泥由昆虫病原线虫感染期线虫和水组成。本发明的方法具有原料易得、容易操作、成本低、占用空间小、贮存时间长、存活率高等的优点。S.longicaudum X‑7线虫与腐殖土按1:0.8~1:1.2混配后于5℃稳定贮存长达180d,存活率仍大于90%。贮存的昆虫病原线虫可以直接撒施到田间用于防治田间害虫,同时也可以作为肥料提高田地肥力。

    一种产业化家蝇幼虫的半自动分离方法

    公开(公告)号:CN106386709A

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201610821118.X

    申请日:2016-09-13

    IPC分类号: A01K67/033

    CPC分类号: A01K67/033

    摘要: 本发明公开了一种产业化家蝇幼虫的半自动分离方法。设有密闭分离室,在密闭分离室的底壁上设有若干个孔,在孔上接有幼虫收集盘,然后将含有家蝇幼虫的培养料放入到密闭分离室中,家蝇幼虫爬出培养料,收集幼虫收集盘中和密闭分离室底壁上的家蝇幼虫。本发明综合了人工分离法和自动分离法的优点,研究了适合产业化分离家蝇幼虫的分离方法,且将此方法应用到了产业化家蝇幼虫的生产分离,取得了良好的分离效果,实现分离并收集率90%以上。

    一种能提高蛹虫草感染寄主昆虫能力的蛹虫草工程菌

    公开(公告)号:CN104195058B

    公开(公告)日:2017-01-25

    申请号:CN201410218655.6

    申请日:2014-05-22

    发明人: 江克清 韩日畴

    IPC分类号: C12N1/15 C12R1/645

    摘要: 本发明公开了一种能提高蛹虫草感染寄主昆虫能力的蛹虫草工程菌。它其是转有冬虫夏草丝氨酸水解酶基因csp1或csp2,并能表达丝氨酸水解酶Csp1或Csp2的蛹虫草,所述的丝氨酸水解酶基因csp1,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述的丝氨酸水解酶基因csp2,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。转外源丝氨酸水解酶基因确实提高了蛹虫草感染大蜡螟的能力,本发明为提高蛹虫草侵染昆虫能力提供技术参考。