一种将基因ZmNAC77应用于玉米中增强根系生长的方法

    公开(公告)号:CN114807214B

    公开(公告)日:2024-02-13

    申请号:CN202210403278.8

    申请日:2022-04-18

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明公开一种将基因ZmNAC77应用于玉米中增强根系生长的方法,包括:(1)将ZmNAC77基因表达片段克隆至玉米过表达载体中,获得重组载体。(2)将所述重组载体导入大肠杆菌中,提取质粒后将其转入农杆菌中得重组农杆菌,然后将所述重组农杆菌转化至玉米植株中,收集其成熟的玉米种子。(3)将所述玉米种子播种后筛选出阳性转基因植株,获得独立转化事件的玉米苗后再次进行繁种,并进行阳性纯系转基因株系筛选。(4)测定该阳性纯系转基因株系中的ZmNAC77表达量,选择目标植株。本发明培育出了能够在玉米中过表达ZmNAC77基因的阳性纯系转基因株系,其根系更长,植株更强壮,也更易生存,有效

    玉米基因ZmNAC77的一个耐盐耐旱新功能及其应用

    公开(公告)号:CN109837296B

    公开(公告)日:2022-06-24

    申请号:CN201910221996.1

    申请日:2019-03-22

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明属于生物科学技术领域,具体涉及一种玉米基因ZmNAC77在同时提高拟南芥干旱和盐胁迫中的应用。本发明从玉米中分离和克隆到基因ZmNAC77,将ZmNAC77的cDNA序列与35S‑1300‑flag相连接,利用农杆菌花序法侵染拟南芥,实验结果表明将ZmNAC77基因在拟南芥中过表达,转基因后的拟南芥的干旱和盐胁迫耐性明显提高。本发明首次分离克隆了玉米基因ZmNAC77,并首次在拟南芥中过量表达了ZmNAC77基因,为培育抗干旱、抗盐转基因植物提供了新思路。

    玉米锌指结合蛋白互作因子基因Actin及其重组表达载体和应用

    公开(公告)号:CN109912704A

    公开(公告)日:2019-06-21

    申请号:CN201910221979.8

    申请日:2019-03-22

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及玉米锌指结合蛋白互作因子基因Actin及其重组表达载体和应用。该基因全长12712bp,为一个完整的表达框,有6个外显子构成,编码123个氨基酸,通过酵母中的表达检测,发现Zm-Actin基因能与Zm-ZnRing基因具有明显的相互调控作用,且两基因共定位在叶绿体中发挥作用。本发明公开的Actin基因具有提高外源基因翻译效率的功能,该锌指结合蛋白是具有E3泛素连接酶活性的,E3泛素连接酶参与植物盐胁迫响应过程中,控制膜运输及产生活性氧来调控细胞的生长代谢,该基因可应用于提高烟草叶片中活性氧的增加以调节细胞的生长代谢。

    基于核酸适配体检测miRNA‑155的方法

    公开(公告)号:CN106884047A

    公开(公告)日:2017-06-23

    申请号:CN201710080037.3

    申请日:2017-02-15

    Applicant: 济南大学

    Inventor: 李慧 徐成功 王玉

    Abstract: 本发明提供了一种基于核酸适配体检测miRNA‑155的方法,本发明是基于核酸适配体与目标物的特异性识别,利用phi29 DNA聚合酶在滚环扩增中的链延伸作用以及核酸内切酶在特异性位点对核酸链的切割作用以及分子信标的荧光基团能够产生荧光信号的特性构建了该生物检测方法。该检测方法具有检测速度快,检测限低,特异性高等优点,可以弥补miRNA‑155现有检测方法的缺陷与不足,实现对其快速,准确的定量检测。

    一种玉米微生物标记物筛选及表型预测方法

    公开(公告)号:CN119252335A

    公开(公告)日:2025-01-03

    申请号:CN202411773964.X

    申请日:2024-12-05

    Applicant: 济南大学

    Inventor: 李慧 王哲 武杨柳

    Abstract: 本发明涉及一种玉米微生物标记物筛选及表型预测方法,属于玉米育种技术领域。其包括以下步骤:微生物样本预处理:获取玉米微生物样本数据,并进行数据清理和标准化操作,生成标准化的微生物丰度表;LEfSe分析筛选差异微生物,最终得到显著差异微生物特征集;基于LightGBM的特征重要性评估:将LEfSe筛选的显著差异微生物特征集划分为训练集和测试集;构建LightGBM模型;LightGBM模型对微生物特征重要性进行计算评估;筛选重要特征得到微生物标记物,用于深入解析玉米表型变化的关键微生物群落特征;模型验证和性能评估:通过模型训练、模型验证及模型性能评估验证筛选出的微生物特征的预测有效性。本发明能够在保留重要生物学特征的同时提升模型的预测效果。

    基于核酸适配体检测miRNA-155的方法

    公开(公告)号:CN106884047B

    公开(公告)日:2021-03-23

    申请号:CN201710080037.3

    申请日:2017-02-15

    Applicant: 济南大学

    Inventor: 李慧 徐成功 王玉

    Abstract: 本发明提供了一种基于核酸适配体检测miRNA‑155的方法,本发明是基于核酸适配体与目标物的特异性识别,利用phi29 DNA聚合酶在滚环扩增中的链延伸作用以及核酸内切酶在特异性位点对核酸链的切割作用以及分子信标的荧光基团能够产生荧光信号的特性构建了该生物检测方法。该检测方法具有检测速度快,检测限低,特异性高等优点,可以弥补miRNA‑155现有检测方法的缺陷与不足,实现对其快速,准确的定量检测。

    一种检测卡那霉素的生物传感器及其制备方法

    公开(公告)号:CN106906277B

    公开(公告)日:2020-09-22

    申请号:CN201710140322.X

    申请日:2017-03-10

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域,特别涉及基于目标物诱导的核酸适配体构象变化检测卡那霉素的生物传感器。具体制备方法为:制备方法:对电极进行预处理;将HAP2层修饰到电极表面;将均相反应混合液修饰到电极表面。本发明利用了核酸适配体的特异型识别,利用卡那霉素的aptamer作为识别物质实现了对目标物卡那霉素的高特异性检测;利用核酸工具酶,实现了目标物的循环利用,起到了信号放大的作用。

    与叶绿体发育相关的CDA1蛋白的原核表达制备方法

    公开(公告)号:CN111196846A

    公开(公告)日:2020-05-26

    申请号:CN202010041797.5

    申请日:2020-01-15

    Applicant: 济南大学

    Inventor: 李慧

    Abstract: 本发明一种与叶绿体发育相关的CDA1蛋白的原核表达制备方法,包括以下步骤:(1)对CDA1蛋白的编码基因进行优化;(2)将优化后的编码基因连入表达载体获得重组表达载体,然后将重组表达载体转入原核表达菌株中,获得工程菌,将工程菌培养至菌液A600OD值为0.5-0.6时,加入诱导剂继续培养10-14h;(3)取加入诱导剂培养后的菌液,离心收集菌体,用收菌缓冲液悬浮菌体;破碎菌体的细胞,离心收集上清液;将上清液进行镍离子亲和层析柱分离,得到纯化后的CDA1蛋白。本发明通过对CDA1蛋白的编码基因进行优化,使其更适合在大肠杆菌宿主中高效率表达目标蛋白;通过对原核表达条件的优化,提高了发酵液上清中的目的蛋白的表达量。

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