一种能抑制乙型脑炎病毒复制与感染的shRNA及其应用

    公开(公告)号:CN102002499B

    公开(公告)日:2012-06-20

    申请号:CN201010507298.7

    申请日:2010-10-14

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,公开了一种能抑制乙型脑炎病毒复制与感染的shRNA及其应用。该shRNA以乙型脑炎病毒基因组中高度保守的序列作为其靶序列,所述的靶序列为:SEQIDNO.9、SEQIDNO.10、SEQIDNO.11或SEQIDNO.12。该shRNA真核表达质粒是将所述的shRNA的模板与线性化的载体pGPU6/GFP/Neo连接得到分别针对乙型脑炎病毒E、NS3或NS4b基因mRNA序列的shRNA真核表达质粒。本发明所提供的shRNA以及shRNA真核表达质粒能够在制备治疗和/或预防JEV感染的药物中应用,为治疗和预防JEV感染提供一种新的可选药物。

    猪口蹄疫重组免疫复合肽的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN101376887B

    公开(公告)日:2010-10-20

    申请号:CN200810155725.2

    申请日:2008-10-08

    Abstract: 本发明涉及猪口蹄疫重组免疫复合肽的构建方法和应用,属于生物工程技术领域。该免疫多肽佐剂为口蹄疫病毒新型辅助T细胞表位(I-S-I-S-E-I-K-G-V-I-V-H-K-I-E-T-I-L-F)和囊素模拟肽(T-P-N-L-K-H-G)通过柔性Linker融合而成。融合基因插入表达载体,转化大肠杆菌,获得高效表达猪口蹄疫重组免疫复合肽的基因工程菌,通过液体培养、纯化制得的猪口蹄疫重组免疫复合肽融合蛋白,该融合蛋白经N端带有His标签的肠激酶去除硫氧还蛋白,再经亲和层析纯化,可获得单一的猪口蹄疫重组免疫复合肽,样品纯度极高。该重组免疫复合肽可作为口蹄疫疫苗的新型多肽免疫佐剂。动物免疫实验证实,安全性好,无毒副作用。能够有效增强机体细胞免疫和体液免疫水平。

    一种重组鸡α干扰素的生产方法及其重组载体

    公开(公告)号:CN100469879C

    公开(公告)日:2009-03-18

    申请号:CN200410041075.0

    申请日:2004-06-24

    Inventor: 陈溥言 蔡梅红

    Abstract: 本发明一种重组鸡α干扰素的生产方法及其重组载体属于用分子生物学方法获得的基因工程生物制品。将鸡α干扰素的基因序列通过电转化方式整合到酵母上的特定位置。采用毕赤酵母表达系统表达外源基因,表达外源蛋白的纯度高于70%,经过65636倍稀释发现能完全抑制100-1000TCID50的水疱性口炎病毒的攻击。鸡α干扰素对VSV和禽流感病毒的转录、翻译阶段抑制能力尤其明显,对新城疫病毒、传染性法氏囊病毒等也都有较强的抑制作用,而且还有强大抗肿瘤、抗增殖作用,对鸡的马立克氏病毒也具有较强的抑制作用。

    猪口蹄疫重组免疫复合肽的制备方法及应用

    公开(公告)号:CN101376887A

    公开(公告)日:2009-03-04

    申请号:CN200810155725.2

    申请日:2008-10-08

    Abstract: 本发明涉及猪口蹄疫重组免疫复合肽的构建方法和应用,属于生物工程技术领域。该免疫多肽佐剂为口蹄疫病毒新型辅助T细胞表位(I-S-I-S-E-I-K-G-V-I-V-H-K-I-E-T-I-L-F)和囊素模拟肽(T-P-N-L-K-H-G)通过柔性Linker融合而成。融合基因插入表达载体,转化大肠杆菌,获得高效表达猪口蹄疫重组免疫复合肽的基因工程菌,通过液体培养、纯化制得的猪口蹄疫重组免疫复合肽融合蛋白,该融合蛋白经N端带有His标签的肠激酶去除硫氧还蛋白,再经亲和层析纯化,可获得单一的猪口蹄疫重组免疫复合肽,样品纯度极高。该重组免疫复合肽可作为口蹄疫疫苗的新型多肽免疫佐剂。动物免疫实验证实,安全性好,无毒副作用。能够有效增强机体细胞免疫和体液免疫水平。

    类天蚕素A-马盖宁杂合基因工程抗菌肽

    公开(公告)号:CN1896107A

    公开(公告)日:2007-01-17

    申请号:CN200610085397.4

    申请日:2006-06-13

    Abstract: 本发明涉及类天蚕素A-马盖宁杂合基因工程抗菌肽,属于生物技术制药工业中的基因工程生产疫苗药物的技术领域。根据抗菌肽天蚕素A(cecropinA,CA)N端第1-7个氨基酸残基,马盖宁(magainin,M)N端第2-12个氨基酸残基,以毕赤酵母偏爱的密码子设计合成了杂合肽CA(1-7)-M(2-12)基因,同载体pPICZα-A连接后,利用点突变技术对其进行突变得到了突变体pPICZα-CA-Mu-1、pPICZα-CA-Mu-2、pPICZα-CA-Mu-3;转化毕赤酵母受体菌SMD1168,在醇氧化酶启动子调控下,分子量约1.9kD的类CecA-Mag杂合抗菌肽获得表达来开发研制相关的基因工程产品。

    检测猪日本脑炎抗体的重组E蛋白ELISA试剂盒

    公开(公告)号:CN1766620A

    公开(公告)日:2006-05-03

    申请号:CN200510094775.0

    申请日:2005-10-13

    Abstract: 本发明检测猪日本脑炎抗体的重组E蛋白ELISA试剂盒,属于生物技术领域。试剂盒包括以重组E蛋白作为包被抗原的ELISA板条,PBS溶液,血清稀释液,显色底物,终止液,JEV阳性血清,JEV阴性血清等。方法经特异性、敏感性、重复性等指标的检验后,将其用于血清样品的检测。本发明的优势体现在有良好的特异性、可大量生产以及检测成本低廉,大大降低了检测成本,有着良好的应用前景。

    一种重组鸡α干扰素的生产方法及其重组载体

    公开(公告)号:CN1594568A

    公开(公告)日:2005-03-16

    申请号:CN200410041075.0

    申请日:2004-06-24

    Inventor: 陈溥言 蔡梅红

    Abstract: 本发明一种重组鸡α干扰素的生产方法及其重组载体属于用分子生物学方法获得的基因工程生物制品。将鸡α干扰素的基因序列通过电转化方式整合到酵母上的特定位置。采用毕赤酵母表达系统表达外源基因,表达外源蛋白的纯度高于70%,经过65636倍稀释发现能完全抑制100-1000TCID50的水疱性口炎病毒的攻击。鸡α干扰素对VSV和禽流感病毒的转录、翻译阶段抑制能力尤其明显,对新城疫病毒、传染性法氏囊病毒等也都有较强的抑制作用,而且还有强大抗肿瘤、抗增殖作用,对鸡的马立克氏病毒也具有较强的抑制作用。

    检测猪繁殖与呼吸综合征抗体的ELISA试剂盒及用法

    公开(公告)号:CN1525170A

    公开(公告)日:2004-09-01

    申请号:CN03158211.7

    申请日:2003-09-15

    Abstract: 本发明检测猪繁殖与呼吸综合征抗体的ELISA试剂盒及其方法,属于生物技术领域。试剂盒包括以重组N蛋白作为包被抗原的ELISA板条、PBS溶液、血清稀释液、兔抗猪酶标二抗、显色底物、终止液、PRRS阳性血清、PRRS阴性血清等。该方法经特异性、敏感性、重复性等指标的检验后,将其用于血清样品的检测。本发明的优势体现在有良好的特异性、可大量生产以及检测成本低廉。与IDEXX公司ELISA试剂盒的检测符合率为91%。大大降低了检测成本,有着良好的应用前景。

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