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公开(公告)号:CN109811067A
公开(公告)日:2019-05-28
申请号:CN201910289659.6
申请日:2019-04-11
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12Q1/6804 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种食品中鸡源成分快速检测试剂盒,涉及生物物种鉴定技术领域。本发明首先筛选出一个鸡源通用内标准基因LOC107053213,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其位于第4染色体上,在鸡物种中拷贝数恒定,不存在等位基因变异,可作为鉴定鸡源的靶基因。以该基因为靶序列设计了PCR扩增引物,PCR反应产物用于铂钯纳米颗粒免疫层析试纸条检测。PCR反应结合基于铂钯纳米颗粒的免疫层析试纸条检测构成快速检测试剂盒,可快速、灵敏地检测食品中的鸡源成分,检测灵敏度可达0.8%(w/w)。本发明试剂盒使用方法简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于现场实时检测。
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公开(公告)号:CN109811065A
公开(公告)日:2019-05-28
申请号:CN201910289657.7
申请日:2019-04-11
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12Q1/6804 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种食品中鹅源成分快速检测试剂盒,涉及生物物种鉴定技术领域。本发明首先筛选出一个鹅源通用内标准基因LOC106029425,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其在鹅物种中拷贝数恒定,不存在等位基因变异,可作为鉴定鹅源的靶基因。以该基因为靶序列设计了PCR扩增引物,与PCR反应液一起进行扩增,PCR反应产物用于铂钯纳米颗粒免疫层析试纸条检测。PCR反应结合基于铂钯纳米颗粒的免疫层析试纸条检测构成快速检测试剂盒,可快速、灵敏地检测食品中的鹅源成分,检测灵敏度可达0.8%(w/w)。本发明试剂盒使用方法简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于现场实时检测。
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公开(公告)号:CN107340389B
公开(公告)日:2019-01-29
申请号:CN201710481882.1
申请日:2017-06-22
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/558 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及一种基于核酸层析生物传感技术检测沙门氏菌的方法,根据沙门氏菌的毒力基因invA,设计环介导等温扩增引物(SEQ ID NO:1‑4),结合纳米酶核酸试纸条,建立一种基于LAMP纳米酶传感器的沙门氏菌检测方法。本方法可成功地用于区分活菌细胞和死菌细胞,对沙门氏菌的检测下限可达10CFU/mL。
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公开(公告)号:CN108949931A
公开(公告)日:2018-12-07
申请号:CN201810634857.7
申请日:2018-06-20
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/686
Abstract: 本发明提供一种锌离子切割型通用隔断超快扩增可视化传感器,包括:(1)切割体系,(2)sPCR扩增体系,(3)HCR体系,(4)包含ABTS显色液的检测体系。本发明通过巧妙地设计引物、模板及探针,使得在锌离子存在下可对模板进行超快扩增,扩增产物通过促发HCR反应,使得产物在适宜环境中形成G四链体。进一步利用G四链体的类过氧化物酶活性进行显色,解决了传统PCR产物难于可视化检测的难题,实现了对锌离子的快速、可视化检测。不仅如此,本发明提供的传感器对锌离子具有高特异、高灵敏的特点,检测结果更加客观、准确。
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公开(公告)号:CN108929900A
公开(公告)日:2018-12-04
申请号:CN201810635972.6
申请日:2018-06-20
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/686
Abstract: 本发明提供一种镉离子切割型通用隔断超快扩增可视化传感器,包括:(1)切割体系,(2)sPCR扩增体系,(3)包含ABTS显色液的检测体系。本发明通过巧妙地设计引物、模板及探针,使得在镉离子存在下可对模板进行超快扩增,并使扩增产物在适宜环境中形成G四链体。进一步利用G四链体的类过氧化物酶活性进行显色,解决了传统PCR产物难于可视化检测的难题,实现了对镉离子的快速、可视化检测。不仅如此,本发明提供的传感器对镉离子具有高特异、高灵敏的特点,检测结果更加客观、准确。
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公开(公告)号:CN108676844A
公开(公告)日:2018-10-19
申请号:CN201810510442.9
申请日:2018-05-24
Applicant: 中国农业大学
CPC classification number: C12Q1/48 , C12Q1/005 , C12Q1/44 , G01N2333/9127
Abstract: 本发明提供了一种双酶放大汞离子生物传感器的构建。本发明传感器,根据汞离子与胸腺嘧啶之间可以形成配位键,使得核酸双链之间形成稳定的平末端,激活外切酶Ⅲ(ExoⅢ),切割平末端的3’端,使得核酸链的3’‑OH端暴露。而末端脱氧核糖转移酶(TdT)在3’‑OH端暴露、无模板的情况下就可以进行链的延伸,通过控制核酸体系中脱氧核糖的配比就可以产生大量的富G序列,富G序列在TMB存在的情况下显色,完成对Hg2+的比色定量检测。在一个具体的实施例中,本发明传感器的检出限为0.2nmol/L、加标回收率在98.75%‑103%。本发明所述传感器及Hg2+检测方法,是一种新的、廉价、快速、灵敏、特异性强、准确度高的产品及方法,丰富了现有检测技术或方法,为新的检测产品或方法的研发提供了思路。
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公开(公告)号:CN108315400A
公开(公告)日:2018-07-24
申请号:CN201810142125.6
申请日:2018-02-11
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/686
Abstract: 本发明提供了一种基于超快速PCR的比色传感新方法,用于Hg2+的可视化超灵敏检测。该新方法根据汞离子胸腺嘧啶错配,设计超快速聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)的扩增引物和模板,同时通过该引物可结合酶联核酸自组装显色模块,整合建立一种新兴的基于错配的汞离子靶标的功能核酸检测新方法和生物传感器。本发明所建立的检测方法和生物传感器,比传统方法更快捷、更灵敏,具备特异性强、灵敏度高、检测结果可靠等优点,可以简化分析检测步骤,缩短分析时间,更重要的是使在线实时检测成为可能,便于携带和野外作业,在重金属快速检测领域,具有非常好的应用前景。
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公开(公告)号:CN108020532A
公开(公告)日:2018-05-11
申请号:CN201711024561.5
申请日:2017-10-27
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明公开了金属离子检测技术领域的一种基于镉的功能核酸的比色传感器及其应用。该比色传感器包括分子识别元件、信号放大元件和信号转换元件,所述分子识别元件包括镉离子脱氧核酶,镉离子脱氧核酶由底物链和酶链组成;所述信号放大元件包括等温扩增体系,等温扩增体系包括扩增模板;所述信号转换元件包括硫代黄色素。本发明比色传感器基于镉离子脱氧核酶、等温指数放大反应和G‑四链体液相传感技术,分子识别元件识别镉离子,并将产生扩增产物,扩增产物在硫代黄色素作用下,形成G‑四链体结构,通过检测荧光强度,计算得出镉离子浓度,具备简便快速、灵敏度高、特异性高、耐高盐以及成本低等优点,可用于环境中镉离子的现场检测。
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公开(公告)号:CN107988323A
公开(公告)日:2018-05-04
申请号:CN201711027585.6
申请日:2017-10-27
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/6825 , C12N15/113 , G01N21/78
Abstract: 本发明公开了金属离子检测技术领域的一种基于铬的功能核酸的传感器及其应用。该传感器包括分子识别元件、信号放大元件和信号转换元件,所述分子识别元件包括铬离子脱氧核酶,铬离子脱氧核酶由底物链和酶链组成;所述信号放大元件包括等温扩增体系和氯高铁血红素,等温扩增体系包括扩增模板;所述信号转换元件包括显色剂。该传感器基于铬离子脱氧核酶、等温指数放大反应和G-四链体液相传感技术,在检测铬离子中简便快速、灵敏度高、特异性高、耐高盐,并可用于环境中铬离子的现场检测。
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