一种酶及其编码基因和它们的应用以及制备人参皂苷Rd的方法

    公开(公告)号:CN110106158A

    公开(公告)日:2019-08-09

    申请号:CN201910337538.4

    申请日:2019-04-25

    申请人: 云南大学

    IPC分类号: C12N9/24 C12N15/56 C12P33/20

    摘要: 本发明公开了一种酶及其编码基因和它们的应用以及制备人参皂苷Rd的方法,属于生物工程技术领域。本发明酶为(a)或(b):(a)由SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成的酶;(b)SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列衍生的酶且衍生酶的活性不变;或由在SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的氨基末端和/或羧基末端连接有标签的氨基酸序列组成的酶;本发明提供了所述酶编码基因,含有该基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌,以及以该酶作为活性成分的组合物,及其在降解糖苷类化合物中的应用,并且提供了一种制备人参皂苷Rd的方法。本发明酶用于降解人参皂苷Rb1和三七总皂苷时,人参皂苷Rd的转化率在94.5%以上。

    玉米黄花叶病毒的RT-LAMP检测试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN109971889A

    公开(公告)日:2019-07-05

    申请号:CN201910302612.9

    申请日:2019-04-16

    申请人: 云南大学

    摘要: 本发明公开了玉米黄花叶病毒的RT‑LAMP检测试剂盒,该试剂盒包括外引物F3和B3,内引物FIP和BIP,还包括RT‑LAMP反应液,RT‑LAMP反应液和特异性RT‑LAMP引物组的混合液组成RT‑LAMP检测体系,该试剂盒可简单、快捷地检测出玉米黄花叶病毒,克服了病毒检测对仪器依赖性较强的局限性。该试剂盒可用于玉米、高粱的玉米黄花叶病毒检测。此外本发明还公开了使用该检测试剂盒检测玉米黄花叶病毒的检测方法,该方法可简便、快捷地从玉米中监测处玉米样品是否收到玉米黄花叶病毒的侵染,提高检测效率。

    烟草花粉管的半离体培养方法

    公开(公告)号:CN107723270A

    公开(公告)日:2018-02-23

    申请号:CN201711193369.9

    申请日:2017-11-24

    IPC分类号: C12N5/04

    CPC分类号: C12N5/04 C12N5/0025

    摘要: 烟草花粉管的半离体培养方法,具体步骤为:取烟草始开期雌蕊,授粉后置于28 ℃恒温箱中预培养;用剃须刀片切割预培养的花柱二分之一或四分之三部位,切割完毕后置于含培养基的载玻片上,在保湿盒中28 ℃继续培养24 h;培养结束后,花粉管从花柱切割部位成束长出;用眼科镊在显微镜下切取花粉管,悬浮于含培养基的离心管中,5000 rpm离心10 min即可获得半离体培养的烟草花粉管。本发明中的培养基组分简单有效,可重复性高,针对花柱不同切割部位设置不同的培养时间和培养基,易于操作,为高效收集烟草半离体培养花粉管提供了有效途径。该方式适用于自交授粉和没有花柱不亲和阻碍的杂交授粉组合,为研究烟草花粉管和雌蕊互作调控机制提供了稳定体系。

    一种诱导植物产生系统抗病性的有机活性诱导剂及其应用

    公开(公告)号:CN101088340B

    公开(公告)日:2010-07-14

    申请号:CN200710066037.4

    申请日:2007-07-16

    申请人: 云南大学

    IPC分类号: A01N61/00 A01P21/00 A01N59/00

    摘要: 一种诱导植物产生系统抗病性的有机活性诱导剂及其应用,属生物技术领域。该有机活性诱导剂成分的质量百分比为:有机质21.5-52.5%(其中多糖含量0.3-15%),无定形SiO230-54%,全N1.2-5%,P0.1-1.5%和K0.2-1.2%,其他9.8-23%;由下列步骤制成;该有机活性诱导剂的制备方法为:将医药工业生产青霉素的固-液混合废弃残渣倒入预混池,按照残渣:硅藻土质量比为10∶1-3的比例,加入干燥的硅藻上,搅拌混合均匀;将上述预混合料100℃-200℃鼓风干燥灭活0.5-2.5小时;挤压造粒或直接用,即得到诱导植物产生系统抗病性的有机活性诱导剂。该有机活性诱导剂作为诱导植物表达病程相关蛋白从而产生抗病性的应用。本发明具有效果佳、无公害、有广泛应用领域等优点,特别适宜需要大量农药才能控制病害的作物种植。

    一种用于边远山区人类血样的DNA提取试剂和方法

    公开(公告)号:CN100445392C

    公开(公告)日:2008-12-24

    申请号:CN200510010800.2

    申请日:2005-05-11

    申请人: 云南大学

    摘要: 本发明涉及一种用于边远山区人类血样的DNA提取的试剂和方法,属生物技术领域。试剂包括DNA保存液;蛋白酶K;由柠檬酸0.48g、柠檬酸钠1.32g、葡萄糖1.47g,加水至1000ml的ACD抗凝剂;由1mM NH4HCO30.079g和115mM NH4Cl 6.15g,加水至1000ml的红细胞裂解液;由100Mm Tris-HCl、其pH为7.6,40mM EDTA、其pH为8.0,50mM NaCl,0.2%SDS和0.05%Sodium azide组成的白细胞裂解液。方法为:用红细胞裂解液RCLB,使血液中的红细胞在常温下去除,在常温下将含DNA的白细胞保存在白细胞裂解液WCLB中保存,其保存时间为四个星期;随后将这些混合标本带回实验室按现有的常规方法进行分离纯化,得到高质量的DNA样本。本发明具有方法简便、成本低、效果佳、有广泛的应用领域等优点,特别适用于边远山区人类血样的DNA提取。

    一株用重复筛选方法获得的高抗紫外线细胞克隆

    公开(公告)号:CN1844369A

    公开(公告)日:2006-10-11

    申请号:CN200610010858.1

    申请日:2006-04-27

    申请人: 云南大学

    IPC分类号: C12N5/04 C12N13/00

    摘要: 本发明涉及一株用重复筛选方法获得的高抗紫外线细胞克隆,属于生物技术领域。本发明的高抗紫外线细胞克隆经由原生质体的获得及紫外线重复筛选工序得到,命名为Anti-UV Clone。该细胞克隆游离成原生质体后可耐受47.5J/cm2紫外线(UVA+UVB)照射。本发明具有操作简便、成本低、抗紫外线效果佳等优点。可用于细胞工程方法大规模繁殖并提取抗紫外线有效成分。

    一种诱导植物表达病程相关蛋白的有机肥及其应用

    公开(公告)号:CN1267008C

    公开(公告)日:2006-08-02

    申请号:CN200510010824.8

    申请日:2005-05-24

    申请人: 云南大学

    IPC分类号: A01N63/00 C05G1/00 A01P21/00

    摘要: 本发明涉及一种诱导植物表达病程相关蛋白的有机肥及其应用,该有机肥成分的重量百分比为:有机质89-92%,全氮6-8%,磷0.8-1.1%和钾1.2-2.1%;该有机肥的制备方法为:将医药工业生产青霉素的固-液混合废弃残渣倒入大水泥池,日晒2-5天,每隔2-4小时搅拌一次,直至残渣成为稀膏状;再将稀膏状的日晒残渣倒入沸腾炉中,在250-350℃温度下干燥1-4小时,粉碎后得到有机肥。该有机肥可以水提液灌根、基肥或追肥的形式施用,作为诱导植物表达病程相关蛋白从而产生抗病性的应用。本发明具有效果佳、有广泛应用领域等优点,特别适应于无公害种植的需要及大量农药才能控制病害的作物。

    一种高效溶磷且促进植物生长的细菌及其应用

    公开(公告)号:CN116814496B

    公开(公告)日:2024-08-13

    申请号:CN202310812536.2

    申请日:2023-07-04

    申请人: 云南大学

    发明人: 陈穗云 王兴红

    摘要: 本发明涉及一种高效溶磷且促进植物生长的细菌,所述细菌为鲍曼不动杆菌Acinetobacter baumannii BJ‑2‑17;保藏地点为广东省微生物菌种保藏中心;保藏时间为2023年6月1日;保藏编号为GDMCC No.63519。本发明的有益效果为,(1)本发明制备的发酵菌液与其他消除连作障碍的方式相比,具有绿色、安全、环保的特点。(2)本发明制备的菌液对黑麦草和烟草具有良好的促生长效果,今后可应用于牧草的生产中,增加产量,提高经济效益。

    一种青霉菌发酵物乙酸乙酯提取物的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN115521944B

    公开(公告)日:2024-04-19

    申请号:CN202211053162.2

    申请日:2022-08-29

    申请人: 云南大学

    摘要: 本发明公开了一种青霉菌发酵物乙酸乙酯提取物的制备方法及其应用,涉及生物技术领域,针对现有的无法很好的提取乙酸乙酯的问题。现提出如下方案,其包括如下原料:经过100℃高温烘干的青霉菌发酵物,甲醇,石油醚,乙酸乙酯,正丁醇,蒸馏水;本发明还提供了一种青霉菌发酵物乙酸乙酯提取物的制备方法,包括如下制备步骤:步骤一:将粉末状的青霉菌发酵物加入10倍量的甲醇中常温浸提24h,期间充分搅拌多次,回流提取3次,温度60℃,过滤,合并滤液。本发明的优点在于:乙酸乙酯提取操作简便、效率高、成本低廉,用于促进植物细胞的增殖效果佳,更为生物源的植物生长调节剂的开发提供了具有开发前景的物质。