一种酿酒酵母制备D-阿洛酮糖的方法

    公开(公告)号:CN117925679A

    公开(公告)日:2024-04-26

    申请号:CN202410265759.6

    申请日:2024-03-07

    摘要: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种酿酒酵母制备D‑阿洛酮糖的方法。本发明首先以酿酒酵母为底盘,构建一种长势迅速、高效表达D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶的工程菌,并在1mL体系中控制转化条件,探寻转化效率和总体阿洛酮糖转化量与菌体量、底物浓度间的关系,随后放大体系,在2L生物反应器中实现全细胞催化生产D‑阿洛酮糖,并通过原位发酵、水洗后发酵、改变补入底物方式及浓度,并重复循环利用发酵菌体,从而提高D‑阿洛酮糖转化效率及终转化量,极大地降低了时间成本和生产成本。

    网状路径产物定向合成
    45.
    发明公开

    公开(公告)号:CN115975962A

    公开(公告)日:2023-04-18

    申请号:CN202211741254.X

    申请日:2022-12-30

    申请人: 天津大学

    摘要: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及网状路径产物定向合成。与利用天然微生物内源路径转化甾体底物相比,本发明在酵母底盘下,利用重新构建人工异源网状路径,通过理性组合路径组分蛋白,可实现定向合成节点产物。通过组合表达不同催化特异性的路径组分同源蛋白,可实现路径转化效率的进一步提升。同时利用在微生物底盘下构建人工孕烯醇酮合成路径,并通过引入特定下游雄烯二酮合成路径组分,实现以简单碳源为底物,定向合成雄烯二酮路径节点化合物。

    混菌避免路径竞争的模块及其应用

    公开(公告)号:CN115851640A

    公开(公告)日:2023-03-28

    申请号:CN202211731558.8

    申请日:2022-12-30

    申请人: 天津大学

    摘要: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及混菌避免路径竞争的模块及其应用。本发明通过混菌共培养策略,利用简单碳源为底物,实现多基因、长路径、复杂网状路径的甾体化合物的从头合成。利用网状路径线性化策略,实现路径简化、并回避不想要的中间反应/竞争反应。氮源限制培养策略中,培养基的氮源浓度较低,减少了发酵过程中氮源投料量,使发酵更为经济。在共培养体系中,通过简便易行地改变几种菌株的初始接菌比例,对发酵过程中菌群比例进行调整。由于不同菌群所含路径元件不同,因此可以实现通过调整初始接菌比例,对路径元件表达强度进行调整。

    一种生产二氢青蒿酸的酿酒酵母工程菌及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN111073822B

    公开(公告)日:2021-08-24

    申请号:CN201911075759.5

    申请日:2019-11-06

    申请人: 天津大学

    IPC分类号: C12N1/19 C12P7/40 C12R1/865

    摘要: 本发明涉及微生物技术领域,公开了一种生产二氢青蒿酸的酿酒酵母工程菌。本发明所述工程菌在通过二氢青蒿酸酿酒酵母异源合成途径改造的酿酒酵母基础上,使其原有表达ALDH1的序列为表达突变的ALDH1H194R或ALDH1V247F的序列。本发明对路径的关键基因ALDH1进行定点突变以获得选择性更好的基因,使代谢路径更偏好二氢青蒿酸的合成,降低青蒿酸所占比例。两个突变体ALDH1H194R和ALDH1V247F在本发明中证明可提高二氢青蒿酸/青蒿酸的比例。在此基础上,将DBR2和ADH1融合表达,同时将突变ALDH1与DBR2融合表达可进一步提高二氢青蒿酸/青蒿酸比例且不牺牲二氢青蒿酸的产量。

    一种高产藏红花酸的酿酒酵母及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN113249239A

    公开(公告)日:2021-08-13

    申请号:CN202110516673.2

    申请日:2021-05-12

    申请人: 天津大学

    摘要: 本发明涉及微生物技术领域,公开了一种高产藏红花酸的酿酒酵母及其构建方法和应用。本发明所述酿酒酵母染色体整合有CCD2和ALD两个蛋白酶的编码基因,或该酿酒酵母中转化有表达CCD2和ALD两个蛋白酶的载体;同时,所述CCD2蛋白酶编码基因的N段融合有HIS标签。本发明在CsCCD2基因的N端融合6x His标签改善CsCCD2在酵母内的可溶性表达,进而提高藏红花酸产量,相比较未融合6x His标签的对照菌株产量提高了36%。

    一种快速筛选藏红花酸高产菌株的方法及其构建方法

    公开(公告)号:CN113201463A

    公开(公告)日:2021-08-03

    申请号:CN202110516129.8

    申请日:2021-05-12

    申请人: 天津大学

    IPC分类号: C12N1/18 C12Q1/04 C12R1/865

    摘要: 本发明涉及微生物技术领域,公开了一种快速筛选藏红花酸高产菌株的方法及其构建方法。本发明所述方法将待筛选菌株采用两相发酵法发酵培养,其中发酵培养基的体积不高于有机相的体积;发酵完成后,测定有机相吸光度,吸光度越高则表示藏红花酸产量越高,通过吸光度高低快速筛选出藏红花酸高产菌株。本发明发现了优化两相发酵中有机相的比例,从而可以使得菌株细胞内的藏红花酸完全排到胞外有机相中,而前体类胡萝卜素底物无外排,从而可通过有机相的吸光度变化判断菌株藏红花酸产量的变化,而不必使用复杂的HPLC法,能够实现快速简便的筛选高产藏红花酸菌株。