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公开(公告)号:CN101328131A
公开(公告)日:2008-12-24
申请号:CN200710057651.4
申请日:2007-06-18
申请人: 天津科技大学
IPC分类号: C07C229/08 , C07C227/40 , C12P13/06
摘要: 本发明公开了一种利用直接发酵法生产L-亮氨酸的提取工艺。该方法包括采用不锈钢管式膜分离系统过滤发酵液,应用离子交换法提取L-亮氨酸,离子交换洗脱液等点结晶,结晶后的母液再用离子交换树脂浓缩以及产品的浓缩和结晶。本发明采用金属膜过滤菌体,改变了常规发酵液处理采用的离心、压滤机压滤等方法,降低了维修费用,降低了工人的劳动强度,除去菌体彻底,节省操作时间;且金属膜使用寿命长,耐高温、耐酸碱、易于清洗且装置维护方便。发酵滤液离子交换和结晶后的母液再用离子交换树脂浓缩,这两步离子交换使得提取总收率以及产品纯度大大提高,并且能够有效降低提取过程的能耗。该方法提取总收率为85.5%,精制产品纯度达98%以上。
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公开(公告)号:CN1332935C
公开(公告)日:2007-08-22
申请号:CN200610014342.4
申请日:2006-06-14
申请人: 天津科技大学
IPC分类号: C07C229/22 , C07C227/40 , C07C227/42
摘要: 一种从发酵液中分离提取L-苏氨酸的方法。解决现有分离提取方法,菌体去除率和产品质量不高的问题。本发明包括:L-苏氨酸发酵液经灭菌后进行金属膜过滤、活性炭脱色、浓缩、结晶等操作步骤,对目标产物进行分离提取,得到精制L-苏氨酸结晶,L-苏氨酸的提取收率大于85%,经氨基酸分析仪分析纯度可达98.5%以上。本发明采用金属膜过滤菌体,改变了常规发酵液处理采用的离心、压滤机压滤等方法,降低了维修费用,降低了工人的劳动强度,除去菌体彻底,过滤液澄清透明;且金属膜使用寿命长,耐高温、耐酸碱、易于清洗且装置维护方便,投资少。提取过程全部采用物理分离方法,过程中消耗的酸、碱及蒸汽低,提取成本大为降低。
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公开(公告)号:CN1865230A
公开(公告)日:2006-11-22
申请号:CN200610014342.4
申请日:2006-06-14
申请人: 天津科技大学
IPC分类号: C07C229/22 , C07C227/40 , C07C227/42
摘要: 一种从发酵液中分离提取L-苏氨酸的方法。解决现有分离提取方法,菌体去除率和产品质量不高的问题。本发明包括:L-苏氨酸发酵液经灭菌后进行金属膜过滤、活性炭脱色、浓缩、结晶等操作步骤,对目标产物进行分离提取,得到精制L-苏氨酸结晶,L-苏氨酸的提取收率大于85%,经氨基酸分析仪分析纯度可达98.5%以上。本发明采用金属膜过滤菌体,改变了常规发酵液处理采用的离心、压滤机压滤等方法,降低了维修费用,降低了工人的劳动强度,除去菌体彻底,过滤液澄清透明;且金属膜使用寿命长,耐高温、耐酸碱、易于清洗且装置维护方便,投资少。提取过程全部采用物理分离方法,过程中消耗的酸、碱及蒸汽低,提取成本大为降低。
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公开(公告)号:CN1834228A
公开(公告)日:2006-09-20
申请号:CN200610013400.1
申请日:2006-03-30
申请人: 天津科技大学
摘要: 以黄色短杆菌(Brevibacterium flavum)HL41(保藏于中国工业微生物菌种保藏管理中心,保藏编号为CICC 10135)为出发菌种,选育具有蛋氨酸缺陷(Met-)、α-氨基丁酸(α-ABr)抗性、S-2-氨基乙基-L-半胱氨酸抗性(AECr)和乙硫氨酸抗性(Ethr)遗传标记的突变株TC21。其在发酵法生产L-异亮氨酸中的应用,将突变株TC21加入发酵培养基中发酵培养,其pH6.0~8.0,培养温度20℃~40℃,振荡培养或发酵罐培养2~5天,接种量为1%~15%(V/V)。本发明利用突变株发酵生产L-异亮氨酸,产酸率和糖酸转化率均达到国内领先水平,利用金属膜过滤和离子交换法提取L-异亮氨酸,大大提高了L-异亮氨酸的提取率与纯度,产品纯度可达98%,提取率50%以上。
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公开(公告)号:CN1834227A
公开(公告)日:2006-09-20
申请号:CN200610013399.2
申请日:2006-03-30
申请人: 天津科技大学
摘要: 黄色短杆菌突变株及用于发酵法生产L-亮氨酸的生产工艺。以黄色短杆菌(Brevibacterium flavum)HL41(CICC 10135)为出发菌种,选育具有遗传标记(Met-+IleL+2-TAr+α-ABr+β-HLr+Rifr+SGr)的突变株TK0303,使其具有L-亮氨酸的生物合成能力。用黄色短杆菌突变株TK0303经扩培、发酵培养、及L-亮氨酸的提取步骤可得到L-亮氨酸粗品,进一步精制可得到L-亮氨酸纯品。本发明利用突变株发酵生产L-亮氨酸,可以大大提高L-亮氨酸的产率,最高产量可达30g/L,其产量完全满足实现大规模工业化生产的要求。本发明利用金属膜过滤法预处理发酵液,并以离子交换法提取L-亮氨酸,纯度可达98%以上,提取率55%。
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公开(公告)号:CN109161536B
公开(公告)日:2022-04-08
申请号:CN201810945637.6
申请日:2018-08-20
申请人: 天津科技大学
摘要: 本发明涉及一种制备尿苷酸用酶制剂以及酶催化制备尿苷酸的方法,该制备方法采用含尿苷的料液为底物,加入具有尿苷激酶和聚磷酸激酶活性的大肠杆菌细胞破碎液、六偏磷酸钠、硫酸镁和少量ATP,在pH 8.0,温度30℃的反应条件下进行酶促反应合成尿苷酸。在上述偶联催化反应体系中,尿苷激酶负责催化尿苷和ATP生成尿苷酸,同时伴随着ATP去磷酸化形成ADP。聚磷酸激酶负责催化六偏磷酸钠和ADP形成ATP,从而实现反应中ATP的再生。本发明提供的尿苷酸生产方法具有原料价格低廉,周期短,操作简便,绿色环保,产率高的优点,具有良好的工业应用价值。
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公开(公告)号:CN112430562B
公开(公告)日:2022-02-22
申请号:CN202011398296.9
申请日:2020-12-04
申请人: 天津科技大学
摘要: 本发明涉及基因工程技术领域,尤其是一种基于复合碳源代谢分工产N‑乙酰氨基葡萄糖的基因工程菌及其应用。通过构建强化N‑乙酰氨基葡萄糖合成途径,并敲除6‑磷酸果糖激酶基因,定向点突变甘油激酶表达基因,对甘油葡萄糖复合碳源的利用进行了代谢分工,使葡萄糖主要用于目标产物N‑乙酰氨基葡萄糖的生产,甘油主要用于细胞生长,以提高N‑乙酰氨基葡萄糖的合成效率。混合碳源培养基摇瓶发酵48h后N‑乙酰氨基葡萄糖的产量最高达到107.8g/L,复合碳源转化率最高达到49%,相比于葡萄糖利用菌株,产量提升了151.7%,转化率提升了60.2%,具有较强的工业化生产潜力。
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公开(公告)号:CN112877270A
公开(公告)日:2021-06-01
申请号:CN202110148120.6
申请日:2021-02-03
申请人: 天津科技大学
IPC分类号: C12N1/21 , C12N15/54 , C12N15/53 , C12N15/60 , C12N15/113 , C12N15/31 , C12P17/12 , C12R1/19
摘要: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种生产羟基四氢嘧啶基因工程菌的构建及其应用。本发明在基因组上对羟基四氢嘧啶合成途径中的关键基因进行强化,并减弱羟基四氢嘧啶竞争抑制途径,构建羟基四氢嘧啶合成途径,并过表达异柠檬酸脱氢酶编码基因icd以增加前体物α‑酮戊二酸的供应,同时通过esaI/esaR群体感应线路策略对前体物质α‑酮戊二酸的供应进行动态调控,根据细胞密度自动调节α‑酮戊二酸在三羧酸循环中的代谢,得到一株羟基四氢嘧啶高产菌。所构建菌株可以在不添加α‑酮戊二酸的发酵条件下,实现羟基四氢嘧啶的高效合成,且无副产物四氢嘧啶的积累,具有重要的工业应用价值。
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公开(公告)号:CN109456987B
公开(公告)日:2021-05-25
申请号:CN201811256143.3
申请日:2018-10-26
申请人: 天津科技大学
IPC分类号: C12N15/54 , C12N15/113 , C12N1/21 , C12P13/06 , C12R1/15
摘要: 本发明涉及一种高产L‑亮氨酸的相关基因及工程菌构建方法与应用,⑴将leuA突变基因整合至cgl1135假基因位点,leuA突变基因见序列1;⑵将ilvBN突变基因整合至cgl1890假基因位点,ilvBN突变基因件序列2;⑶PCP_2928特异性启动子替换柠檬酸合酶原始启动子,PCP_2928特异性启动子序列见序列3。采用本发明所提供的技术方案在摇瓶发酵30h可生产L‑亮氨酸32g/L,在5L发酵罐发酵50h左右可生产亮氨酸60g/L,最大生产强度可达1.5g/(L×h),糖酸转化率为30%,是目前报道的发酵法生产L‑亮氨酸的最高水平。
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